Модели дифференсиатсияи адипоситҳои 3T3-L1, низоми таҷрибавии in vitro мебошад, ки дар он преадипоситҳои пайдоиши мушӣ дар шароити назоратшавандаи лабораторӣ ба ҳуҷайраҳои монанд ба адипоситҳои баркамол табдил дода шуда, адипогенез ва ҷамъшавии липидҳои дохилиҳуҷайравӣ омӯхта мешаванд. Ин таҳқиқот санҷидааст, ки панҷ экстракти оби гарм, ки аз меваҳои норасидаи ҳангоми тунуккунии мева дар парвариши манго хориҷшуда тайёр шудаанд, ин раванди дифференсиатсияи ҳуҷайравиро бозмедоранд ё не. Таҳқиқот на коҳиши вазн ё табобати фарбеҳиро дар одамон, балки дифференсиатсияи адипоситҳо, ҷамъшавии липидҳо ва баъзе нишондиҳандаҳои mRNA-и марбут ба адипогенезро дар фарҳанги ҳуҷайра арзёбӣ мекунад.

Аз чор навъи мангои ду хоҷагӣ панҷ намуна тайёр карда шудааст: GuiBi (CS-GB), YuWen (CS-YW), JinHuang (CS-JH) ва Irwin (CS-IR) аз Cheon-Su Farm; Irwin (LS-IR) аз Lee Seong-Ko Farm. Меваҳо хушк ва майда карда шуда, бо истифода аз оби дистиллшуда дар ҳаҷми 10 баробар дар 100 °C барои 3 соат экстраксия шудаанд, экстракт концентратсия ва бо усули яхкунонида-хушккунӣ хушк карда шудааст. Ҳосили экстраксия аз %41,75 то %63,52 тағйир ёфтааст.

Санҷиши MTT дар консентратсияҳои 10, 50, 100 ва 200 µg/mL барои 24 соат гузаронида шудааст. Дар ҳамаи панҷ экстракт то 100 µg/mL зиндамонии ҳуҷайраҳо аз %80 боло мондааст. Дар 200 µg/mL бошад, CS-IR то %78,39 ва LS-IR то %77,00 коҳиш ёфта, аз ҳадди %80 зиндамонӣ, ки муҳаққиқон истифода кардаанд, поён рафтааст. Аз ин рӯ, дар таҷрибаҳои дифференсиатсияи адипоситҳо 1, 10 ва 100 µg/mL истифода шудааст.

Дар таҳлили Oil Red O ҳамаи коркардҳо бо экстракти манго дар муқоиса бо адипоситҳое, ки бе экстракт дифференсиатсия карда шудаанд, ҷамъшавии липидҳои дохилиҳуҷайравиро аз ҷиҳати оморӣ ба таври назаррас кам кардаанд. Бо вуҷуди ин, натиҷаҳо дар ҳамаи намунаҳо робитаи мунтазами доза-ҷавобро нишон намедиҳанд. Масалан, сатҳи ҷамъшавии липид дар CS-GB дар 1 µg/mL %45,48 буда, дар 100 µg/mL %61,68 аст; LS-IR бошад, дар 1, 10 ва 100 µg/mL мутаносибан %68,91, %63,49 ва %56,54 нишон дода, бо зиёд шудани доза коҳиши пайдарпай доштааст.

Дар таҳлили endpoint RT-PCR бо экстрактҳои 100 µg/mL омили транскрипсионии барвақти адипогенез Cebpb, дар ҳамаи панҷ экстракт нисбат ба гурӯҳи адипоситҳои дифференсиатсияшуда дар сатҳи пасттар муайян шудааст. Adipoq ва Lep низ дар ҳамаи гурӯҳҳои экстракт коҳиш ёфтаанд. Баръакс, Pparg ва Lpl ба намуна вобастаанд: баъзе экстрактҳо ин генҳоро паст карданд, дар ҳоле ки баъзеи дигар нисбат ба назорати адипосит арзиши баландтар нишон доданд. Аз ин рӯ, хулосаи мутлақи «ҳамаи генҳои адипогенез бо ҳамаи экстрактҳои манго боздошта шуданд» аз ҷониби маълумоти муфассал дастгирӣ намешавад.

Муаллифони манбаъ махсусан экстрактҳои CS-YW ва LS-IR-ро аз ҷиҳати таъсири умумии антиадипогенӣ барҷаста медонанд. Бо вуҷуди ин, кадом пайвастагии кимиёвӣ барои ин таъсир масъул аст, дар ин таҳқиқот муайян нашудааст. Таҳқиқот фраксияҳои кимиёвӣ ё молекулаҳои фаъоли экстрактро муайян накардааст; таҷрибаи ҳайвонот, арзёбии фармакокинетикӣ ё озмоиши клиникии инсонро анҷом надодааст.

1. «Мангои норасида, ки ҳангоми тунуккунии мева ҷудо шудааст» чӣ маъно дорад?

Тунуккунии мева — қасдан хориҷ кардани қисми меваҳои ҷавоне мебошад, ки дарахти мева дар ҷараёни истеҳсол мебардорад. Ҳадаф дастгирии рушди меваҳои боқимонда ва сифати тиҷоратии онҳо мебошад. Мангоҳои норасидае, ки дар ин раванд ҷудо мешаванд, аксаран маҳсулоти асосии тиҷоратӣ нестанд ва метавонанд миқдори назарраси маҳсулоти иловагиро ташкил диҳанд.

Масъалаи таҳқиқотӣ эҳтимоли он аст, ки ин меваҳои норасида ба ҷойи он ки танҳо маводи кишоварзии барои партофтан ҳисобида шаванд, манбаи функсионалӣ бошанд. Аммо таҳқиқот ин эҳтимолро на бо таҳияи мустақими маҳсулот ё таҷрибаи истеъмоли инсон, балки тавассути таъсир ба адипогенез дар сатҳи фарҳанги ҳуҷайра меомӯзад.

2. Намунаҳои мангои истифодашуда

Ҳосили экстраксия нишон медиҳад, ки чӣ қадар аз массаи хушки намунаи пеш аз экстраксия ҳамчун экстракти бо яхкунонида-хушккунӣ гирифташуда барқарор шудааст.

Гарчанде дар манбаъ муодилаи алоҳидаи рақамгузоришуда мавҷуд нест, ифодаи математикии усулро барои омӯзиш чунин нишон додан мумкин аст:

\[ \text{Ekstraksiyon verimi (\%)} = \frac{\text{dondurarak kurutulmuş ekstrakt kütlesi}} {\text{ekstraksiyon öncesi örnek kütlesi}} \times100 \]

Ин таносуб фаъолияти биологиро чен намекунад. Масалан, ҳосили баланди экстраксияи CS-JH ба андозаи %63,52 худ аз худ маънои онро надорад, ки он таъсири пурқувваттарини антиадипогенӣ дорад.

3. Экстракти манго чӣ гуна тайёр карда шуд?

1. Мангоҳои норасида шуста ва бурида шуданд.
2. Дар хушккунаки ғизоии LD-918BT барои 24 соат хушк карда шуданд.
3. Маводи хушкшуда майда карда шуд.
4. Ба намунаи майдашуда аз рӯйи ҳаҷм 10 баробар оби дистиллшуда илова карда шуд.
5. Дар 100 °C барои 3 соат экстраксияи оби гарм анҷом дода шуд.
6. Экстракт бо буғкунандаи вакуумии RK-1020 концентратсия карда шуд.
7. Бо хушккунаки яхкунонидаи LP 20 хушк карда шуд.
8. Экстрактҳои тайёршуда то таҷрибаҳо дар −20 °C нигоҳ дошта шуданд.

Аз ин рӯ, маводи таҳқиқшуда мустақиман бофтаи хоми манго нест. Маводе, ки ба ҳуҷайраҳо дода шудааст, экстракти мураккабест, ки аз равандҳои хушккунӣ → майдакунӣ → экстраксияи оби гарм → концентратсия → яхкунонида-хушккунӣ гузаштааст.

Манбаъ таҳлил намекунад, ки ин экстрактҳо кадом пайвастагиҳои алоҳидаи кимиёвиро дар чӣ миқдор доранд. Аз ин рӯ, гуфтани он ки фаъолияти мушоҳидашудаи ҳуҷайравӣ аз мангиферин, як полифеноли муайян ё дигар як молекулаи ягона ба вуҷуд омадааст, аз ҳудуди ин таҳқиқот берун меравад.

Дифференсиатсияи Адипоситҳои 3T3-L1 дар Ин Таҳқиқот Чиро Нишон Медиҳад?

Дифференсиатсияи адипоситҳои 3T3-L1 модели in vitro мебошад, ки дар он преадипоситҳо бо гормонҳо ҳавасманд карда шуда, ба ҳуҷайраҳои монанд ба адипоситҳои баркамоли захиракунандаи липид табдил меёбанд; дар ин таҳқиқот он барои санҷидани он истифода шудааст, ки экстрактҳои манго ҳангоми ин табдил ташаккули қатраҳои липид ва ифодаи генҳои марбут ба адипогенезро тағйир медиҳанд ё не. Модел тамоми физиологияи фарбеҳии инсонро намояндагӣ намекунад ва боздории адипогенез дар фарҳанги ҳуҷайра худ аз худ маънои коҳиши вазн дар одамонро надорад.

4. Гузариш аз преадипосит ба адипосит чӣ гуна сурат мегирад?

Адипогенез, раванди дифференсиатсияи ҳуҷайраҳои пешгузаштаи чарбӣ ба адипоситҳои баркамол мебошад. Дар ин раванд барномаи ифодаи генҳои ҳуҷайра тағйир меёбад, қобилияти синтез ва захираи липид меафзояд ва дар ситоплазма қатраҳои липид пайдо мешаванд.

Расми 1-и манбаъ занҷири танзимкунандаи ба адабиёт асосёфтаро ҷамъбаст мекунад. Srebp-1c ҳамчун танзимгари сатҳи болоӣ бо фаъолшавии Cebpb алоқаманд аст; сипас Cebpb ба фаъолшавии омилҳои асосии транскрипсионии адипогенез, аз ҷумла Cebpa ва Pparg, саҳм мегузорад. Ин занҷир рушди фенотипи адипосити баркамолро дастгирӣ мекунад.

5. Кадом генҳо воқеан чен карда шуданд?

Ҳадафҳое, ки дар манбаъ бо RT-PCR чен шудаанд:

• Cebpb: CCAAT/enhancer-binding protein beta; омили транскрипсионии марҳилаи барвақти адипогенез.
• Pparg: peroxisome proliferator-activated receptor gamma; яке аз омилҳои марказии транскрипсионӣ дар дифференсиатсияи адипоситҳо.
• Adipoq: гени adiponectin; бо фенотипи адипосити баркамол алоқаманд аст.
• Lpl: гени lipoprotein lipase; бо равандҳои истифода ва захираи липидҳо алоқаманд аст.
• Lep: гени leptin; гормони лептинро, ки аз адипоситҳо ҷудо мешавад, код мекунад.
• Actb: beta-actin; ҳамчун истинод барои нормализатсияи тасмаҳои генҳои ҳадаф истифода шудааст.

Гарчанде Srebp-1c ва Cebpa дар заминаи биологии таҳқиқот тавсиф ва дар Расми 1 нишон дода шудаанд, онҳо дар панели таҷрибавии RT-PCR чен карда нашудаанд. Аз ин рӯ, таъсири экстрактҳо ба ин ду генро аз ин таҳқиқот мустақиман баровардан мумкин нест.

6. Ҷадвали вақти дифференсиатсияи ҳуҷайра

Ҳуҷайраҳои 3T3-L1 дар DMEM-и дорои 10% BCS ва 1% penicillin-streptomycin дар 37 °C парвариш карда шуданд. Лаҳзае, ки ҳуҷайраҳо %100 конфлюент шуданд, ҳамчун day −2 муайян гардид.

Экстрактҳои манго аз day −2 то day 6 пайваста истифода шуданд. Муҳити дифференсиатсия бошад, марҳила ба марҳила иваз карда шуд.

7. Таркиби муҳити дифференсиатсия

Differentiation medium (DM) байни day 0–2:

• 5,2 µM dexamethasone,
• 174 nM insulin,
• 500 µM IBMX,
• DMEM-и дорои 10% FBS

-ро дар бар мегирад.

Аз day 2–4 ҳуҷайраҳо бо post-DM-и дорои 174 nM insulin; аз day 4–6 бошад, бо DMEM-и дорои 10% FBS парвариш карда шуданд.

Dexamethasone, IBMX ва insulin дар якҷоягӣ ангезаҳои таҷрибавии дифференсиатсия мебошанд, ки барномаи генетикии адипогении ҳуҷайраҳои 3T3-L1-ро фаъол мекунанд. Онҳо дар ин таҳқиқот на ҳамчун табобати фарбеҳӣ, балки барои сохтани модели назоратшавандаи дифференсиатсияи ҳуҷайра истифода шудаанд.

Оё Санҷишҳои MTT ва Oil Red O Як Чизро Чен Мекунанд?

Не. Санҷиши MTT бо истифода аз қобилияти ҳуҷайраҳо барои ба таври метаболикӣ барқарор кардани MTT ба формазан дар бораи зиндамонӣ/ситотоксикӣ маълумоти ғайримустақим медиҳад, дар ҳоле ки санҷиши Oil Red O қатраҳои липиди нейтрали дохили ҳуҷайраро ранг карда, ҷамъшавии липидҳои марбут ба дифференсиатсияи адипоситҳоро арзёбӣ мекунад. Аз ин рӯ, барои нишон додани он ки коҳиши миқдори липид аз марги ҳуҷайраҳо ба вуҷуд наомадааст, аввал бояд доираи консентратсияҳои ғайритоксикӣ муайян карда шавад.

8. Санҷиши MTT чӣ гуна кор мекунад?

Дар усули манбаъ ҳуҷайраҳои 3T3-L1 дар 24-well plate парвариш шуда, экстрактҳои манго дар консентратсияи 10, 50, 100 ё 200 µg/mL барои 24 соат истифода шудаанд.

Сипас ба ҳар чоҳак аз маҳлули %10 MTT 500 µL илова шуда, дар 37 °C барои 1 соат инкубатсия карда шудааст. Маҳсулоти бунафши формазан, ки аз ҷониби ҳуҷайраҳои аз ҷиҳати метаболикӣ фаъол ҳосил шудааст, бо DMSO ҳал карда шуда, абсорбанс дар 570 nm бо VersaMax microplate reader чен шудааст.

Намоиши стандартии математикии мантиқи ҳисобкунии манбаъ:

\[ \text{Hücre canlılığı (\% kontrol)} = \frac{A_{\text{uygulama}}}{A_{\text{işlemsiz kontrol}}} \times100 \]

чунин аст. Ин ифода муодилаи рақамгузоришуда дар манбаъ нест; он намоиши таълимии математикии ҳисобкунии “% of control” мебошад.

Натиҷаи MTT шумораи ҳуҷайраҳоро мустақиман намешуморад. Азбаски қобилияти барқарор кардани MTT ба фаъолияти метаболикии ҳуҷайра вобаста аст, санҷиш нишондиҳандаи ғайримустақими зиндамонӣ мебошад, ки дар арзёбии ситотоксикӣ васеъ истифода мешавад.

9. Натиҷаҳои зиндамонии ҳуҷайра дар MTT

Манбаъ зиндамонии ҳуҷайраҳоро дар сатҳи %80 ё бештар ҳамчун ҳадди амалие қабул мекунад, ки барои муайян кардани доираи ғайритоксикӣ дар таҷрибаҳои минбаъдаи фаъолияти in vitro истифода мешавад.

Дар 100 µg/mL ҳамаи панҷ экстракт аз ин ҳад боло мебошанд. Дар 200 µg/mL танҳо CS-IR ва LS-IR аз %80 поён мераванд. Аз ин рӯ, гуфтани «200 µg/mL барои ҳамаи экстрактҳои манго ситотоксикӣ аст» дуруст нест. Манбаъ дар тарҳи таҷриба 100 µg/mL-ро ҳамчун консентратсияи умумии болоии бехатар интихоб кардааст.

Илова бар ин, таҷрибаи MTT танҳо таъсири 24-соатаро арзёбӣ кардааст. Дар таҷрибаҳои дифференсиатсияи адипоситҳо бошад, экстрактҳо аз day −2 то day 6 истифода шудаанд. Манбаъ барои ин давраи дарози истифода санҷиши ҷудогонаи силсилаи вақт барои зиндамониро гузориш намекунад.

10. Oil Red O чиро ранг мекунад?

Oil Red O ранги липофилӣ мебошад ва қатраҳои липиди нейтралеро, ки дар адипоситҳо ҷамъ мешаванд, намоён мекунад. Дар преадипоситҳои дифференсиатсиянашудаи 3T3-L1 қатраҳои липид хеле каманд, аммо бо анҷом ёфтани адипогенез сохторҳои липидии сурхранг дар ҳуҷайраҳо зиёд мешаванд.

Дар таҳқиқот ҳуҷайраҳо дар day 6 ду маротиба бо PBS шуста, бо %3,7 formaldehyde фиксатсия шудаанд ва ба ҳар чоҳак 500 µL маҳлули 3 mg/mL Oil Red O илова карда шуда, 15 дақиқа ранг карда шудаанд.

Пас аз арзёбии визуалӣ Oil Red O бо DMSO ҳал карда шуда, абсорбанс дар 510 nm чен шудааст.

Ифодаи математикии тавсифи “% of control” дар манбаъ барои омӯзиш:

\[ \text{Lipid birikimi (\% kontrol)} = \frac{A_{510,\text{ekstrakt}}} {A_{510,\text{yalnız farklılaştırılmış adiposit}}} \times100 \]

чунин нишон дода мешавад. Арзиши паст маънои нигоҳдории камтари Oil Red O ва аз ин рӯ ҷамъшавии камтари липидҳои нейтралиро дорад.

Усул ва Натиҷаҳои Таҳқиқот

11. Ҷамъшавии липид, ки бо Oil Red O чен шудааст

Мувофиқи Figure 4-и манбаъ, ҳамаи гурӯҳҳои коркардшуда бо экстракти манго нисбат ба гурӯҳе, ки дифференсиатсияи адипосит бе истифодаи экстракт анҷом дода шудааст, ҷамъшавии липиди ба таври назаррас пасттар нишон додаанд; дар шарҳи расм барои ин муқоисаҳо ***P<0,001 гузориш шудааст.

Аммо таъсири консентратсия дар ҳамаи экстрактҳо яксон нест.

• Дар CS-GB пасттарин ҷамъшавии липиди гузоришшуда дар 1 µg/mL аст.
• Дар CS-YW се консентратсия ба ҳам хеле наздиканд.
• Дар CS-JH арзиши 1 µg/mL аз 10 ва 100 µg/mL пасттар аст.
• Дар CS-IR пасттарин арзиш дар 10 µg/mL аст.
• Дар LS-IR бошад, дар тартиби 1 → 10 → 100 µg/mL коҳиши мунтазам дида мешавад.

Манбаъ дар баёни натиҷаҳо боздории қавиро дар гурӯҳи 100 µg/mL таъкид мекунад; аммо арзишҳои ададии нашршуда барои ҳамаи панҷ экстракт робитаи умумии монотонии доза-ҷавобро нишон намедиҳанд. Ин ду сатҳ бояд ҷудогона тафсир карда шаванд.

12. RT-PCR дар ин ҷо дақиқ чӣ кор кард?

Усули истифодашуда дар таҳқиқот PCR-и миқдории вақти воқеӣ (qPCR) нест, балки равиши endpoint RT-PCR мебошад, ки пас аз reverse transcription PCR шиддати тасмаҳои гели агарозӣ бо ImageJ чен карда мешавад.

Экстрактҳои 100 µg/mL манго аз day −2 то day 6 истифода шуданд; дар day 6 RNA-и умумӣ бо истифода аз TRIzol ҷудо карда шуд. RNA ба cDNA табдил дода шуда, маҳсулоти PCR дар гели агарозии %2 ҷудо ва шиддати тасмаҳои генҳои ҳадаф бо ImageJ чен карда шуд.

Шиддати тасмаи ҳар гени ҳадаф Actb яъне нисбат ба тасмаи beta-actin нормализатсия карда шуд.

Ҳамчун ҷузъиёти хеле муҳим, манбаъ махсус таъкид мекунад, ки ягон гурӯҳи назоратӣ худсарона ба %100 собит карда нашудааст. Аз ин рӯ, масалан, дидани “Pparg 118,41” дар Расми 5 набояд ҳамчун “%118-и назорат” тафсир шавад; инҳо арзишҳои таносуби нашршудаанд, ки аз таносуби шиддати тасмаи гени ҳадаф/Actb ҳосил шудаанд.

13. Пайдарпаии праймерҳои RT-PCR

14. Ҳамаи натиҷаҳои ифодаи ген

ND, дар манбаъ маънои онро дорад, ки тасмаи Adipoq дар гурӯҳи преадипосит муайян нашудааст.

15. Натиҷаи Cebpb

Cebpb аз 7,03 дар преадипоситҳо то 96,79 дар адипоситҳо афзудааст. Ин афзоиши калон яке аз натиҷаҳои манбаъ мебошад, ки фаъол шудани барномаи дифференсиатсияро нишон медиҳад.

Дар истифодаи экстрактҳои 100 µg/mL:

• CS-GB: 63,62
• CS-YW: 12,94
• CS-JH: 42,80
• CS-IR: 57,57
• LS-IR: 50,21

муайян шудааст. Ҳамаи панҷ экстракт арзиши Cebpb-и пасттар аз гурӯҳи адипосит нишон додаанд. Арзиши пасттарин дар CS-YW аст.

Ин натиҷа тафсири муаллифонро дастгирӣ мекунад, ки экстрактҳои манго метавонанд бо яке аз марҳилаҳои барвақти транскрипсионии барномаи адипогенез алоқаманд бошанд.

16. Чаро натиҷаи Pparg бояд бо эҳтиёти бештар тафсир шавад?

Pparg аз 32,53 дар преадипоситҳо то 102,12 дар адипоситҳо афзудааст.

Гурӯҳҳои экстракт:

• CS-GB: 92,20
• CS-YW: 97,59
• CS-JH: 105,93
• CS-IR: 101,35
• LS-IR: 118,41

ин арзишҳоро нишон додаанд.

Дар ин ҷо боздории Pparg дар ҳамаи экстрактҳо вуҷуд надорад. CS-GB, CS-YW ва CS-IR аз арзиши адипосит пасттар ё ба он хеле наздиканд, дар ҳоле ки CS-JH ва махсусан LS-IR арзиши баландтар нишон додаанд.

Аз ин рӯ, ибораи «боздории Pparg» дар хулосаи манбаъ набояд ҳамчун натиҷаи якхелае хонда шавад, ки ба ҳамаи панҷ экстракт ба як дараҷа дахл дорад.

17. Натиҷаи Adipoq

Adipoq дар гурӯҳи преадипосит муайян нашуда, дар гурӯҳи адипосит то сатҳи 91,61 афзудааст. Ҳамаи гурӯҳҳои экстракт аз ин арзиши адипосит пасттар мондаанд.

Арзиши пасттарин 27,90 дар CS-IR дида шудааст.

Ин натиҷа бо коҳиши ифодаи Adipoq, ки бо фенотипи адипосити баркамол алоқаманд аст, ҳангоми истифодаи экстракт мувофиқат мекунад.

18. Чаро натиҷаи Lpl гетерогенӣ аст?

Lpl дар преадипоситҳо 7,15 ва дар адипоситҳо 80,29 гузориш шудааст.

Ҳангоми истифодаи экстрактҳо:

• CS-GB: 134,29
• CS-YW: 39,13
• CS-JH: 81,42
• CS-IR: 63,99
• LS-IR: 40,62

чен карда шудааст.

CS-YW, CS-IR ва LS-IR аз гурӯҳи адипосит арзиши пасттар нишон медиҳанд. Баръакс, CS-JH ба гурӯҳи адипосит хеле наздик аст, дар ҳоле ки CS-GB ба таври назаррас баландтар мебошад.

Аз ин рӯ, барои Lpl хулосаи «пасттанзимшавӣ дар ҳамаи панҷ экстракт» баровардан мумкин нест.

19. Натиҷаи Lep

Lep аз 43,59 дар преадипоситҳо то 100,89 дар адипоситҳои дифференсиатсияшуда афзудааст.

Дар ҳамаи панҷ гурӯҳи экстракт нисбат ба назорати адипосит арзиши пасттар гузориш шудааст:

• CS-GB: 92,15
• CS-YW: 36,98
• CS-JH: 42,88
• CS-IR: 87,82
• LS-IR: 32,60

Арзиши пасттарин дар LS-IR аст; CS-YW ва CS-JH низ арзишҳои ба таври назаррас паст нишон додаанд.

20. Ибораи «CS-YW ва LS-IR пурқувваттарин экстрактҳо мебошанд» чӣ гуна бояд хонда шавад?

Тафсири умумии хулоса ва бахши натиҷаҳои манбаъ намунаҳои CS-YW ва LS-IR-ро аз ҷумлаи намунаҳои барҷастатарин аз ҷиҳати фаъолияти антиадипогенӣ нишон медиҳад.

Аммо ченкуниҳои гуногун экстрактҳои гуногуни «беҳтарин»-ро нишон медиҳанд:

• Аз рӯйи Cebpb арзиши пасттарин дар CS-YW аст.
• Аз рӯйи Adipoq арзиши пасттарин дар CS-IR аст.
• Аз рӯйи Lpl арзиши пасттарин дар CS-YW аст.
• Аз рӯйи Lep арзиши пасттарин дар LS-IR аст.
• Аз рӯйи Pparg арзиши пасттарин дар байни экстрактҳо дар CS-GB аст.
• Дар Oil Red O вобаста ба консентратсия тартибҳои гуногун пайдо мешаванд.

Аз ин рӯ, барҷаста кардани CS-YW ва LS-IR на ба як биомаркери ягона, балки ба тафсири умумии муаллифон, ки тамоми профили таҷрибавиро якҷоя арзёбӣ мекунад, асос ёфтааст.

21. Таҳлили оморӣ

Ҳамаи таҷрибаҳо дар се такрор анҷом дода шуда, додаҳо дар шакли миёна±инҳирофи стандартӣ пешниҳод шудаанд.

Таҳлили оморӣ бо SPSS Version 18 анҷом дода шуда, фарқиятҳо байни гурӯҳҳои назоратӣ ва таҷрибавӣ бо Student's t-test арзёбӣ шудаанд.

Сатҳҳои аҳамиятнокии дар манбаъ истифодашуда:

• *P<0,05
• **P<0,01
• ***P<0,001

чунин мебошанд.

Манбаъ барои шумораи зиёди муқоисаҳои гурӯҳӣ ислоҳи алоҳидаи муқоисаҳои сершуморро гузориш намекунад. Илова бар ин, ба таври муфассал ҷудо карда нашудааст, ки такрорҳои «n=3» таҷрибаҳои комилан мустақили биологӣ буданд ё дар баъзе ченкуниҳо такрорҳои техникӣ.

22. Вазифаҳои илмии Расмҳои 3–5

Figure 3, зиндамонии ҳуҷайраҳоро ҳангоми санҷиши 24-соатаи MTT бо экстрактҳои манго нишон медиҳад ва барои интихоби доираи консентратсияе хизмат мекунад, ки дар таҷрибаҳои минбаъдаи дифференсиатсия истифода мешавад.

Расми 4A–B, тасвирҳои воқеии ҳуҷайраҳои бо Oil Red O рангшуда мебошанд. Онҳо дар бораи шумора, андоза ва тақсимоти қатраҳои липид далели мушоҳидавии сифатӣ медиҳанд. Азбаски ин додаҳои воқеии микроскопӣ/тасвирӣ мебошанд, Verianla тасвири сунъии ҳуҷайра эҷод накардааст.

Расми 4C, ченкунии миқдории Oil Red O-ро бо абсорбанс пешниҳод мекунад. Ин додаҳо дар ҷадвали HTML-и боло бо арзишҳои манбаъ оварда шудаанд.

Расми 5, тасмаҳои воқеии гели агарозӣ барои Cebpb, Pparg, Adipoq, Lpl ва Lep ва натиҷаҳои денситометрии ImageJ-и онҳоро якҷоя нишон медиҳад. Худи тасвирҳои тасмаҳо далели таҷрибавии raster мебошанд; арзишҳои ададӣ дар ҷадвали боло нигоҳ дошта шудаанд.

Оё Ин Натиҷаҳо Коҳиши Вазнро дар Одамон Исбот Мекунанд?

Не. Таҳқиқот танҳо дифференсиатсияи адипоситҳо, ҷамъшавии липидҳо ва баъзе нишонаҳои mRNA-ро дар фарҳанги ҳуҷайраҳои 3T3-L1 омӯхтааст; дар ҳайвонот вазни бадан, массаи чарбӣ ё параметрҳои метаболикӣ чен нашудаанд ва дар одамон дахолати клиникӣ анҷом дода нашудааст. Аз ин рӯ, натиҷаҳо дастгирӣ мекунанд, ки экстрактҳои мангои норасида метавонанд номзади маводи функсионалии антиадипогенӣ бошанд, аммо нишон намедиҳанд, ки онҳо фарбеҳиро дар одамон табобат мекунанд ё вазнро кам мекунанд.

23. Натиҷаҳое, ки таҳқиқот мустақиман дастгирӣ мекунад

• Панҷ экстракти мангои норасида то 100 µg/mL дар санҷиши 24-соатаи MTT зиндамонии ҳуҷайраҳои аз %80 боло нишон додаанд.
• Дар 200 µg/mL CS-IR ва LS-IR аз ҳадди %80 зиндамонӣ поён рафтаанд.
• Истифодаи экстрактҳо дар 1, 10 ва 100 µg/mL ҷамъшавии липиди бо Oil Red O ченшударо нисбат ба назорати адипосит ба таври назаррас кам кардааст.
• Ҷавоби Oil Red O дар ҳамаи намунаҳо доза-ҷавоби монотониро нишон намедиҳад.
• Ҳамаи экстрактҳои 100 µg/mL арзиши Cebpb-ро нисбат ба гурӯҳи адипосит паст кардаанд.
• Арзишҳои Adipoq ва Lep низ дар ҳамаи панҷ экстракт аз гурӯҳи адипосит пасттар буданд.
• Ҷавобҳои Pparg ва Lpl вобаста ба экстракт гетерогенӣ мебошанд ва дар ҳамаи гурӯҳҳо паст нашудаанд.
• Дар арзёбии умумии муаллифони манбаъ CS-YW ва LS-IR ҳамчун номзадҳои қавии антиадипогенӣ барҷаста шудаанд.

24. Натиҷаҳое, ки таҳқиқот мустақиман дастгирӣ намекунад

• Нишон дода нашудааст, ки экстракти мангои норасида дар одамон вазнро кам мекунад.
• Барои одамон дозае, ки бехатар аст, муайян нашудааст.
• Биодастрасии даҳонӣ ё фармакокинетика омӯхта нашудааст.
• Фаъолияти зидди фарбеҳӣ дар ҳайвонот дар ин таҳқиқот санҷида нашудааст.
• Ситотоксикии дарозмуддат арзёбӣ нашудааст.
• Компоненти фаъоли кимиёвии экстракт муайян нашудааст.
• Мангиферин ё дигар молекулаи муайян ҳамчун сабаби фаъолияти мушоҳидашуда исбот нашудааст.
• Srebp-1c ва Cebpa дар ин таҳқиқот мустақиман бо RT-PCR чен карда нашудаанд.
• Нишон дода нашудааст, ки ҳамаи экстрактҳо ҳамаи генҳои адипогенезро дар як самт бозмедоранд.
• Рангшавии камтари Oil Red O дар фарҳанги ҳуҷайра бо коҳиши чарби бадани инсон ҳаммаъно нест.
• Дозаи воқеии самаранок ва устуворӣ дар маҳсулоти ғизоӣ, нӯшокӣ ё иловагӣ арзёбӣ нашудааст.

25. Тафсири асосии биологии таҳқиқот

Занҷири таҷрибавии аз ҳама муттасил чунин аст:

1. Ҳуҷайраҳои 3T3-L1 бо ангезаҳои адипогенез ба самти адипосити баркамол дифференсиатсия карда шуданд.
2. Экстрактҳои манго дар консентратсияҳои интихобшудаи ғайритоксикӣ дар тӯли дифференсиатсия истифода шуданд.
3. Бо Oil Red O коҳиши ҷамъшавии липидҳои дохилиҳуҷайравӣ мушоҳида шуд.
4. Пасттар будани Cebpb дар ҳамаи экстрактҳо нишон дод, ки дар марҳилаи барвақти транскрипсионии барномаи адипогенез тағйирот вуҷуд дорад.
5. Дар генҳои марбут ба адипосити баркамол, аз ҷумла Adipoq ва Lep, коҳиши умумӣ дида шуд.
6. Натиҷаҳои Pparg ва Lpl бошанд, нишон медиҳанд, ки ҳамаи экстрактҳо як ҷавоби молекулавии яксонро ба вуҷуд намеоранд.

Аз ин рӯ, ифодаи аз ҳама содиқ ба додаҳои мақола ин аст, ки экстрактҳои мангои норасида дар модели 3T3-L1 дифференсиатсияи адипоситҳо ва ҷамъшавии липидҳоро бозмедоранд ва фаъолияти in vitro антиадипогенӣ нишон медиҳанд.

26. Ҷиҳатҳои қавӣ

Таҳқиқот танҳо ба як ченкунӣ асос наёфтааст. Бо MTT доираи ситотоксикӣ муайян карда шуд; бо Oil Red O ҷамъшавии липид ҳам аз ҷиҳати морфологӣ ва ҳам спектрофотометрӣ арзёбӣ гардид; сипас панҷ гени марбут ба адипогенез бо RT-PCR омӯхта шуданд.

Илова бар ин, истифодаи дар маҷмӯъ панҷ намуна аз чор навъи гуногуни манго ва ду хоҷагии гуногун гуногунӣ фароҳам меорад, ки хатари вобаста будани натиҷаҳо ба танҳо як намунаи мангоро коҳиш медиҳад.

27. Маҳдудиятҳои асосӣ

Маҳдудияти якум: Таҳқиқот комилан дар сатҳи in vitro аст.

Маҳдудияти дуюм: Молекула ё молекулаҳои фаъол муайян нашудаанд. Таҳқиқот экстрактҳои мураккаби оби гармро санҷидааст.

Маҳдудияти сеюм: Арзёбии бехатарии MTT ба таъсири 24-соата асос ёфтааст, дар ҳоле ки истифодаи экстракт дар таҷрибаи дифференсиатсия аз day −2 то day 6 идома кардааст.

Маҳдудияти чорум: Ченкунии ифодаи ген ба endpoint RT-PCR ва денситометрияи тасма асос ёфтааст; миқдорсанҷии qPCR бар асоси Ct истифода нашудааст.

Маҳдудияти панҷум: Гарчанде дар манбаъ n=3 гузориш шудааст, мустақилияти биологӣ ва техникии такрорҳо ба таври муфассал муайян нашудааст.

Маҳдудияти шашум: Натиҷаҳои Pparg ва Lpl вобаста ба экстрактҳо гетерогенӣ мебошанд; дар ҳамаи генҳои ҳадаф боздории умумӣ дида нашудааст.

Маҳдудияти ҳафтум: Дар натиҷаҳои Oil Red O барои ҳамаи экстрактҳо робитаи яксон ва монотонии доза-ҷавоб вуҷуд надорад.

Маҳдудияти ҳаштум: Бехатарӣ, самаранокӣ, биодастрасӣ ва натиҷаҳои воқеии метаболикӣ дар инсон ё ҳайвон арзёбӣ нашудаанд.

Муаллифони манбаъ низ таъкид мекунанд, ки таҳқиқот дар сатҳи in vitro боқӣ мондааст ва муайян кардани компонентҳои фаъол, таҳқиқоти муфассалтари механизми молекулавӣ, моделҳои in vivo ва тасдиқи преклиникӣ/клиникӣ барои истифода дар инсон заруранд.

Ёддошт оид ба Манбаъ ва Усул

Унвони аслии кореягӣ: 망고(Mangifera indica L.) 미숙과 추출물의 3T3-L1 지방세포 분화 억제를 통한 항비만 활성

Унвони аслии англисӣ: Anti-Obesity Activity of Extracts from Thinned Immature Mango (Mangifera indica L.) via the Inhibition of 3T3-L1 Adipocyte Differentiation

Муаллифон: Hee-Bin Ku ва Gyo-Nam Kim.

Муаллифи масъул: Gyo-Nam Kim.

Саҳми баробар: Дар манбаъ изҳорот оид ба саҳми баробар вуҷуд надорад.

Муассиса: Department of Pharmaceutical Engineering, Kyungnam University, Changwon, Gyeongnam, Republic of Korea.

Маҷалла: Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition.

Ташкилоти нашркунанда: The Korean Society of Food Science and Nutrition.

Сабти библиографӣ: 2026; 55(3):211–218.

DOI: 10.3746/jkfn.2026.55.3.211.

Санаи пешниҳод: 19 сентябр 2025.

Санаи бознигарӣ: 24 декабр 2025.

Санаи қабул: 31 декабр 2025.

Санаи нашр: Сабти библиографии беруна санаи 31 март 2026-ро нишон медиҳад.

Навъи манбаъ: Мақолаи таҷрибавии таҳқиқотии нашршуда; таҳқиқоти in vitro дар фарҳанги ҳуҷайраҳои 3T3-L1.

Ҳолати preprint: Ҳуҷҷати пешниҳодшуда версияи нашршудаи маҷалла аст; дар PDF сабти ҷудогонаи preprint нишон дода нашудааст.

Иҷозатнома: Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0).

Маводи асосӣ: Меваҳои норасидаи Mangifera indica L., ки аз ҷониби Cheon-Su Farm ва Lee Seong-Ko Farm таъмин шудаанд.

Навъҳои манго: GuiBi, YuWen, JinHuang ва Irwin.

Экстраксия: Ба маводи хушк ва майдашуда 10 баробар аз рӯйи ҳаҷм оби дистиллшуда; экстраксияи оби гарм барои 3 соат дар 100 °C; концентратсияи вакуумӣ; яхкунонида-хушккунӣ; нигоҳдорӣ дар −20 °C.

Хатти ҳуҷайра: 3T3-L1; Korea Cell Line Bank.

Фарҳанги ҳуҷайра: DMEM-и дорои 10% BCS + 1% penicillin-streptomycin; 37 °C.

Муҳити дифференсиатсия: 5,2 µM dexamethasone + 174 nM insulin + 500 µM IBMX + 10% FBS-DMEM.

Истифодаи экстракт: Day −2 → day 6; 1, 10 ва 100 µg/mL.

Санҷиши MTT: 10, 50, 100 ва 200 µg/mL; 24 соат; MTT 1 соат; абсорбанс 570 nm.

Oil Red O: Day 6; фиксатсияи %3,7 formaldehyde; 3 mg/mL Oil Red O; 15 дақиқа; арзёбии миқдорӣ 510 nm.

RT-PCR: Day 6; 100 µg/mL экстракт; экстраксияи RNA бо TRIzol; синтези cDNA; endpoint PCR; гели агарозии %2; денситометрияи ImageJ; нормализатсияи Actb.

Омор: Миёна±инҳирофи стандартӣ; n=3; SPSS Version 18; Student's t-test; ҳадҳои P<0,05, P<0,01 ва P<0,001.

Ёддошти муҳими тафсири MTT: Дар хулосаи манбаъ ситотоксикӣ дар 200 µg/mL таъкид шудааст; дар маълумоти муфассал намунаҳое, ки аз %80 паст шудаанд, CS-IR (%78,39) ва LS-IR (%77,00) мебошанд. Се экстракти дигар дар 200 µg/mL аз %80 боло мондаанд.

Ёддошти муҳими доза-ҷавоб: Додаҳои Oil Red O барои ҳамаи экстрактҳо боздории монотонии вобаста ба консентратсияро нишон намедиҳанд. LS-IR доза-ҷавоби равшан нишон медиҳад, дар ҳоле ки дар баъзе намунаҳои дигар арзишҳои 1 ё 10 µg/mL аз 100 µg/mL пасттаранд.

Ёддошти муҳими ифодаи ген: Баёни умумии манбаъ боздории генҳои марбут ба адипогенезро таъкид мекунад; рақамҳои муфассал коҳиши муттасилро барои Cebpb, Adipoq ва Lep нишон медиҳанд, дар ҳоле ки Pparg ва Lpl дар ҳамаи экстрактҳо дар як самт тағйир наёфтаанд.

Ёддошт оид ба нормализатсияи RT-PCR: Манбаъ ошкоро мегӯяд, ки ягон гурӯҳ ҳамчун истиноди собити %100 қабул нашудааст. Арзишҳои нашршудаи ифодаи ген ба таносуби шиддати тасмаи гени ҳадаф ба Actb асос ёфтаанд.

Маҳдудияти компоненти фаъол: Таркиби муфассали кимиёвии экстрактҳо ва молекулаи ягонаи фаъоле, ки барои фаъолияти мушоҳидашуда масъул аст, дар ин таҳқиқот муайян нашудааст.

Маблағгузорӣ: Дар PDF-и пешниҳодшуда изҳороти ҷудогонаи маблағгузорӣ вуҷуд надорад.

Дастрасии додаҳо: Дар PDF-и пешниҳодшуда бахши ҷудогонаи Data Availability вуҷуд надорад.

Ихтилофи манфиатҳо: Дар PDF-и пешниҳодшуда изҳороти ҷудогонаи Conflict of Interest вуҷуд надорад.

Саҳмҳои муаллифон: Дар PDF-и пешниҳодшуда бахши ҷудогонаи CRediT/Author Contributions вуҷуд надорад; нақшҳо тахмин карда нашудаанд.

Формулаҳои рақамгузоришуда: Дар манбаъ муодилаи математикии рақамгузоришуда вуҷуд надорад. Ҳосили экстраксия, зиндамонии ҳуҷайра ва мантиқи % назорат дар Verianla танҳо барои омӯзонидани сохтори ҳисобкунии усул дар шакли стандартии математикӣ нишон дода шудаанд.