Cuscutae Semen (CS) маводи тухмии хушкшудаест, ки дар ин таҳқиқот барои муқоисаи он истифода шуд, ки об ва этанол то кадом дараҷа метавонанд аз як ашёи хоми растанӣ ҷузъҳои гуногуни кимиёвиро истихроҷ кунанд ва ин фарқият дар ченкуниҳои антиоксидантӣ ва зиддиилтиҳобии ҳуҷайравӣ чӣ гуна инъикос меёбад. Муҳаққиқон аз ҳамон мавод экстракти обӣ (CSW; Cuscutae Semen water extract) ва экстракти этанолӣ (CSE; Cuscutae Semen ethanol extract) омода карда, полифеноли умумӣ, флавоноиди умумӣ, DPPH, ABTS ва FRAP-ро чен карданд. Сипас дар ҳуҷайраҳои макрофагии муши RAW 264.7, ки бо LPS ҷавоби илтиҳобӣ ба вуҷуд оварда шуда буд, қобилияти ҳаётии ҳуҷайраҳо, оксиди нитроген (NO), намудҳои реактивии оксиген (ROS), сатҳҳои TNF-α ва IL-6, инчунин экспрессияи mRNA-и TLR4, MyD88, NF-κB, TNF-α, IL-6, iNOS ва COX-2-ро омӯхтанд.

Экстраксия бо об аз рӯи ҳосили умумии экстракти хушк натиҷаи баландтар дод: ҳосили экстраксия барои CSW %12.98 ва барои CSE %4.45 буд. Баръакс, экстракти этанолӣ аз ҷиҳати миқдори умумии флавоноид ва қобилияти барқароркунии FRAP аз экстракти обӣ қавитар буд. Миқдори умумии флавоноид барои CSE 375.08 mg RE/g ва барои CSW 158.31 mg RE/g гузориш шудааст. Нишондодҳои безараргардонии радикали DPPH барои CSW ва CSE мутаносибан %84.66 ва %87.52; нишондодҳои безараргардонии радикали ABTS бошад мутаносибан %99.41 ва %98.69 буданд. Фаъолияти FRAP дар CSE тақрибан 2.8 маротиба аз CSW зиёд буд. Дар таҳқиқот байни FRAP ва полифеноли умумӣ r=0.991 ва байни FRAP ва флавоноиди умумӣ r=0.994 коррелятсияи мусбат гузориш шудааст (P<0.01).

Дар модели ҳуҷайравии RAW 264.7 ҳангоми истифодаи 50, 100 ва 200 µg/mL CSW ё CSE муҳаққиқон дар консентратсияҳои омӯхташуда заҳролудии равшани ҳуҷайравиро мушоҳида накарданд. Истеҳсоли NO ва ROS, ки LPS зиёд карда буд, бо ҳар ду экстракт вобаста ба консентратсия коҳиш ёфт; махсусан натиҷаи ROS дар CSE бо 200 µg/mL аз ҷиҳати оморӣ дар ҳамон гурӯҳе қарор дошт, ки гурӯҳи назоратии бе LPS. Ҷудошавии TNF-α бо ҳар ду экстракт нисбат ба гурӯҳи LPS кам шуд ва ҷудошавии IL-6 ҳангоми истифодаи CSE нисбат ба гурӯҳи LPS ба таври назаррас коҳиш ёфт.

Натиҷаҳои RT-qPCR маҳдудияти муҳими механистиро нишон медиҳанд. Экстрактҳо экспрессияи mRNA-и iNOS, COX-2, TNF-α ва IL-6-и марбут ба илтиҳобро, ки дар поёноби сигнализатсия бо LPS зиёд шуда буданд, коҳиш доданд; баръакс, дар сатҳҳои mRNA-и TLR4, MyD88 ва NF-κB тағйироти назаррас гузориш нашудааст. Аз ин рӯ, таҳқиқот хулосаи “экспрессияи гени NF-κB мустақиман фурӯ нишонда шуд”-ро дастгирӣ намекунад. Илова бар ин, сатҳи сафедаи NF-κB, фосфорилатсияи он, транслокатсияи ҳастаӣ ё фаъолияти пайвастшавӣ ба DNA дар доираи ин таҳқиқот мустақиман чен нашудааст.

Ин натиҷаҳо бозёфтҳои лаборатории in vitro мебошанд. RAW 264.7 хати ҳуҷайравии макрофагии муш аст; таҳқиқот ҷаббиш, метаболизм, дастрасии биологӣ, вояи бехатар, табобати беморӣ ё самаранокии клиникиро дар одамон наомӯхтааст. Аз ин рӯ, аз ин таҳқиқот хулоса баровардан мумкин нест, ки экстрактҳои Cuscutae Semen дар одамон табобати зиддиилтиҳобӣ медиҳанд ё бемории муайянро пешгирӣ мекунанд.

Саволи асосии таҳқиқот чист?

Дар экстраксияи растанӣ на танҳо “кадом растанӣ истифода шудааст”, балки “кадом ҳалкунанда истифода шудааст” низ муҳим аст. Ҳамаи пайвастагиҳои ашёи хом қутбнокӣ ва ҳалшавандагии яксон надоранд. Аз ин рӯ, миқдори умумии моддае, ки бо об истихроҷ мешавад, метавонад аз миқдори умумии моддае, ки бо этанол истихроҷ мешавад, фарқ кунад; таркиби кимиёвии ду экстракт ва рафтори онҳо дар таҷрибаҳои биологӣ низ метавонанд гуногун бошанд.

Масъалаи асосии ин таҳқиқот муқоисаи он аст, ки экстраксияҳои обӣ ва этанолӣ барои Cuscutae Semen на танҳо миқдори умумии экстракт, балки таркиби полифенол/флавоноид, иқтидори кимиёвии антиоксидантӣ ва ҷавобҳои марбут ба илтиҳобро дар макрофагҳои бо LPS ангезонидашуда чӣ гуна тағйир медиҳанд.

Cuscutae Semen чист?

Манбаи таҳқиқот маводро бо номи Cuscutae Semen (CS) муайян карда, онро ҳамчун маводи тухмии пухтаи хушкшудаи растании паразитии яксолаи мансуб ба оилаи Convolvulaceae шарҳ медиҳад. Гарчанде ки дар қисми муқаддимавии манбаъ ба ҷинси Cuscuta ва таҳқиқоти қаблӣ оид ба Cuscuta chinensis ишора шудааст, дар қисми методҳо барои маводи харидашудаи CS, ки дар ин таҷриба истифода шудааст, муайянкунии мустақили намуд, рақами voucher specimen ё тасдиқи DNA-баркод оварда нашудааст. Аз ин рӯ, матни Verianla маводи таҷрибавиро ҳамон тавре ки дар манбаъ истифода шудааст, “Cuscutae Semen” нигоҳ медорад ва ҳувияти таксономии дар сатҳи намуд тасдиқнашударо қатъӣ намекунад.

Чаро стресси оксидшавӣ ва илтиҳоб якҷоя баррасӣ шуданд?

Дар чаҳорчӯби назариявии манбаъ стресси оксидшавӣ ҳамчун вайроншавии тавозун байни истеҳсоли намудҳои реактивии оксиген ва радикалҳои озод ва системаи муҳофизати антиоксидантӣ муайян мешавад. Вақте ки макрофагҳо бо ангезандаҳои илтиҳобӣ, ба монанди LPS, фаъол мешаванд, ROS, оксиди нитроген ва роҳҳои гуногуни сигнализатсияи марбут ба илтиҳоб метавонанд фаъол гарданд. Аз ин рӯ, муҳаққиқон аввал хусусиятҳои кимиёвии антиоксидантии экстрактҳоро ва баъдан ҷавобҳои ROS, NO, ситокин ва mRNA-и ҳамон экстрактҳоро дар модели илтиҳоби ҳуҷайравӣ арзёбӣ карданд.

Чаро Ҳосили Баландтари Экстраксия Маънои Таркиби Қавитари Антиоксидантиро Надорад?

Ҳосили экстраксия миқдори умумии моддаи хушкеро нишон медиҳад, ки аз маводи ибтидоӣ ба ҳалкунанда мегузарад; ченкуниҳо ба монанди полифенол, флавоноид ё FRAP бошад хусусиятҳои муайяни кимиёвии ҳамин моддаи умумии хушкро нишон медиҳанд. Дар ин таҳқиқот, гарчанде ҳосили моддаи хушки экстраксияи обӣ бо %12.98 аз ҳосили %4.45-и этанол ба таври назаррас баландтар буд, экстракти этанолӣ аз ҷиҳати таркиби флавоноид ва иқтидори FRAP қавитар буд. Ин нишон медиҳад, ки мафҳумҳои “экстракти умумии бештар” ва “ҷузъи ҳадафии антиоксидантии бештар” як чиз нестанд.

Муаллифони манбаъ ин фарқиятро бо қутбнокии ҳалкунанда алоқаманд мекунанд. Об ҳалкунандаи дорои қутбнокии баланд аст; этанол нисбат ба об қутбнокии пасттар дорад ва ҳамзамон қобилияти дигаргунаи ҳамкорӣ бо сохторҳои гидрофилӣ/гидрофобиро дорад. Аз ин рӯ, ду ҳалкунанда, ҳатто агар ҳамон тухмро истифода баранд, маҷбур нестанд экстракти дорои таркиби молекулавии яксон ҳосил кунанд.

Омодасозии намуна

Ашёи хоми Cuscutae Semen, ки дар таҳқиқот истифода шуд, аз маводи дар Август 2024 дар минтақаи Chungju, Chungcheongbuk-do ҷамъоваришуда ба таври тиҷоратӣ дастрас карда шуд. Намунаҳо се маротиба бо оби дистиллшуда шуста, дар дар 37°C 24 соат бо ҳавои гарм хушк ва майда карда шуданд.

Барои ҳар як экстраксия 20 g маводи хока бо 180 mL ҳалкунанда омехта карда шуд. Барои гурӯҳи обӣ оби дистиллшуда ва барои гурӯҳи этанолӣ этанол истифода шуд; ҳар ду дар колбаи конусшакл дар ҳарорати хона 24 соат бо омехтакунӣ экстраксия карда шуданд. Сипас ҷисмҳои сахт бо коғази филтрии Whatman No.2 хориҷ шуда, дар rotary evaporator консентратсия гузаронида шуд ва экстрактҳо бо роҳи яхкунонида хушк кардан хушк карда шуданд.

Полифеноли умумӣ чӣ гуна чен карда шуд?

Таҳлили полифеноли умумӣ бо истифода аз реактиви Folin-Ciocalteu гузаронида шуд. 160 µL аз экстракти тунукшуда бо 160 µL реактиви Folin-Ciocalteu омехта карда шуда, дар ҳарорати хона се дақиқа барои реаксия гузошта шуд. Сипас 160 µL аз маҳлули %10 sodium carbonate илова карда шуда, омехта дар торикӣ як соат нигоҳ дошта шуд. Абсорбанс дар дастгоҳи хонандаи микропластинкаи Versamax дар 700 nm чен карда шуд.

Дар қисми методҳо ба таври возеҳ гуфта шудааст, ки каҷи стандартии gallic acid истифода шуда, натиҷаҳо ҳамчун mg gallic acid equivalents per gram, яъне mg GAE/g ҳисоб карда шудаанд. Ин воҳид маънои онро надорад, ки экстракт маҳз ҳамин қадар gallic acid дорад; он эквиваленти ҷавоби умумии Folin-Ciocalteu-и намуна нисбат ба стандарти gallic acid-ро ифода мекунад.

Флавоноиди умумӣ чӣ гуна чен карда шуд?

Дар ченкунии флавоноиди умумӣ ба 40 µL намунаи тунукшуда 16 µL %10 aluminum nitrate ва 16 µL 1 M potassium acetate илова карда шуда, баъдан 328 µL метанол илова гардид. Пас аз 40 дақиқа реаксия дар торикӣ абсорбанс дар 415 nm чен карда шуд. Ҳамчун стандарт rutin истифода шуда, натиҷаҳо ҳамчун mg rutin equivalents per gram (mg RE/g) ифода гардиданд.

Дар параграфи натиҷаҳои манбаъ барои CSE 375.08 mg RE/g ва барои CSW 158.31 mg RE/g флавоноиди умумӣ гузориш шудааст. Таносуби ин арзишҳо тақрибан 2.37 аст ва бо ибораи муаллифон “тақрибан 2.4 маротиба” мувофиқат мекунад.

Чаро дар манбаъ барои воҳиди полифеноли умумӣ эзоҳи махсус лозим аст?

Дар дохили манбаъ номувофиқии навишт/гузориш вуҷуд дорад. Дар қисми мавод-метод гуфта мешавад, ки натиҷаҳои полифеноли умумӣ аз рӯи стандарти gallic acid ҳамчун mg GAE/g ҳисоб шудаанд ва меҳвари y-и полифеноли умумии Шакли 1 низ “mg GAE/g” нишонгузорӣ шудааст. Аммо дар параграфи натиҷаҳо ҳангоми овардани арзишҳои 340.28 барои CSE ва 158.31 барои CSW воҳид ҳамчун “mg RE/g” дода шудааст. Гарчанде ҳамон параграф ин ду арзишро тақрибан 2.4 маротиба тавсиф мекунад, таносуби 340.28/158.31 тақрибан 2.15 аст. Verianla ин зиддиятро хомӯшона ислоҳ намекунад; бозёфти асосӣ, ки дар полифеноли умумӣ гурӯҳи этанол аз гурӯҳи об ба таври назаррас баландтар аст, метавонад боэътимод нигоҳ дошта шавад, аммо омезиши баҳсноки воҳид/рақам набояд ҳамчун маълумоти нави қатъӣ пешниҳод шавад.

Санҷиши безараргардонии радикали DPPH чиро чен мекунад?

DPPH санҷиши кимиёвии антиоксидантӣ аст, ки ба тағйирёбии ранг/абсорбанс ҳангоми гирифтани электрон ё гидроген аз намуна аз ҷониби радикали озоди устувор асос меёбад. Дар таҳқиқот 100 µL намунаи тунукшуда бо 100 µL маҳлули 0.2 mM DPPH омехта шуда, пас аз 30 дақиқа реаксия дар ҳарорати хона абсорбанс дар 517 nm чен карда шуд.

Ҳисобе, ки дар манбаъ истифода шудааст:

\(\text{DPPH süpürme (\%)} = \left(1-\frac{A_{\text{örnek}}}{A_{\text{kontrol}}}\right)\times100\)

Формула чиро ҳисоб мекунад? Он бо фоиз нишон медиҳад, ки абсорбанси радикали DPPH дар ҳузури намуна нисбат ба гурӯҳи назоратӣ то чӣ андоза коҳиш ёфтааст.

Тағйирёбандаҳо: \(A_{\text{örnek}}\), абсорбанси реаксияе, ки намуна илова шудааст; \(A_{\text{kontrol}}\), абсорбанси реаксияи назоратӣ мебошад.

Рафтори математикӣ: бо кам шудани \(A_{\text{örnek}}\) таносуб кам мешавад, \(1-\) таносуб зиёд мешавад ва фоизи ҳисобшудаи безараргардонӣ афзоиш меёбад.

Тафсир: Дар шароити якхелаи таҷриба фоизи баландтари безараргардонӣ маънои ҷавоби қавитари безараргардонии радикали DPPH-ро дорад. Ин арзиш фоизи мустақими таъсири антиоксидантӣ дар бадани инсон нест.

Дар манбаъ барои CSW %84.66 ва барои CSE %87.52 фаъолияти безараргардонии DPPH гузориш шудааст.

Санҷиши ABTS чӣ гуна гузаронида шуд?

Дар ченкунии ABTS аз маҳлулҳои 70 mM ABTS ва 24.5 mM potassium persulfate ҳар кадом 500 µL гирифта, 4 mL оби дистиллшуда илова карда шуд ва барои ҳосил шудани радикал омехта дар торикӣ 12-16 соат нигоҳ дошта шуд. Маҳлули радикалии ABTS-и ҳосилшуда бо %50 этанол чунон тунук карда шуд, ки абсорбанс дар 734 nm 0.70±0.05 бошад. Сипас 50 µL намуна бо 100 µL маҳлули ABTS омехта шуда, абсорбанс дар 734 nm чен карда шуд.

Манбаъ ҳамон сохтори умумии ҳисобро истифода кардааст:

\(\text{ABTS süpürme (\%)} = \left(1-\frac{A_{\text{örnek}}}{A_{\text{kontrol}}}\right)\times100\)

Барои CSW %99.41 ва барои CSE %98.69 фаъолияти безараргардонии радикали ABTS гузориш шудааст. Манбаъ қайд мекунад, ки ҳар ду арзиш фаъолияти баланд доранд ва ба назорати мусбати ascorbic acid наздиканд.

FRAP чиро чен мекунад?

Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) санҷиши антиоксидантии бар интиқоли электрон асосёфта мебошад, ки қобилияти намуна барои барқарор кардани оҳани ferric аз шакли Fe³⁺ ба шакли ferrous Fe²⁺-ро арзёбӣ мекунад. Дар манбаъ маҳлулҳои 300 mM acetate buffer (pH 3.6), 10 mM TPTZ ва 20 mM FeCl₃·6H₂O бо таносуби 10:1:1 омехта ва дар дар 37°C 30 дақиқа нигоҳ дошта шуданд. Аз намунаи тунукшуда 50 µL ва аз реактиви FRAP 150 µL истифода шуд; пас аз реаксияи 30-дақиқаӣ дар дар 37°C абсорбанс дар 593 nm чен карда шуд.

Манбаъ гузориш медиҳад, ки фаъолияти FRAP-и CSE тақрибан 2.8 маротиба аз CSW зиёд аст ва CSE қобилияти баланди барқароркуниро дар сатҳи монанд ба назорати мусбати ascorbic acid нишон медиҳад. Гарчанде дар шакл сутунҳои мутлақи FRAP мавҷуданд, азбаски дар матни мақола арзишҳои дақиқи ададии FRAP барои CSE ва CSW ҷудогона оварда нашудаанд, Verianla аз рӯи график арзишҳои тахминиро бо дақиқии сохта қатъӣ намекунад.

Байни ҷузъҳои антиоксидантӣ ва FRAP чӣ гуна робита ёфт шуд?

Дар таҳлили коррелятсияи Pearson байни фаъолияти FRAP ва полифеноли умумӣ r=0.991, P<0.01; байни FRAP ва флавоноиди умумӣ бошад r=0.994, P<0.01 муайян шудааст. Ба +1 хеле наздик будани арзиши r нишон медиҳад, ки ченкуниҳо дар ин гурӯҳи таҷрибавӣ ҳамтағйирии қавии мусбат доранд.

Аммо коррелятсия сабабият нест. Дар ду гурӯҳи экстракт ҳамзамон боло рафтани ченкуниҳои полифенол/флавоноид ва FRAP исбот намекунад, ки “танҳо ҳамин як молекула сабаби афзоиши ченшудаи FRAP шудааст”. Экстрактҳо омехтаи бисёр пайвастагиҳо мебошанд ва таҳқиқот саҳми мустақили ҳар як пайвастагиро ҷудо накардааст.

Чаро Дар Ин Таҳқиқот Модели RAW 264.7 ва LPS Истифода Шуд?

RAW 264.7 хати ҳуҷайравии макрофагии аз муш гирифташуда аст; LPS бошад липополисахаридест, ки дар мембранаи берунии бактерияҳои Gram-манфӣ ҷойгир буда, метавонад дар макрофагҳо ҷавоби қавии илтиҳобӣ ба вуҷуд орад. Муҳаққиқон ин моделро барои омӯхтани таъсири экстрактҳои Cuscutae Semen ба NO, ROS, TNF-α, IL-6 ва ҳадафҳои гуногуни mRNA-и марбут ба илтиҳоб дар муҳити назоратшавандаи фарҳанги ҳуҷайра истифода бурданд. Модел барои таҳқиқи механизм муфид аст, аммо илтиҳоби клиникиро дар одамон айнан ифода намекунад.

Шароити парвариши ҳуҷайраҳои RAW 264.7

Ҳуҷайраҳои RAW 264.7 аз Korean Cell Line Bank дастрас карда шуданд. Ҳуҷайраҳо дар Dulbecco's Modified Eagle's Medium бо иловаи %10 fetal bovine serum ва %1 penicillin-streptomycin, дар шароити %5 CO₂ ва 37°C парвариш карда шуданд.

Санҷиши MTT қобилияти ҳаётии ҳуҷайраҳоро чӣ гуна арзёбӣ кард?

Ҳуҷайраҳо ба пластинкаҳои 96-чоҳадор ба миқдори 5×10⁴ ҳуҷайра барои ҳар чоҳ кошта шуда, 12-24 соат барои часпидан гузошта шуданд. Дар гурӯҳи илтиҳоб 1 µg/mL LPS як соат истифода шуд; сипас CSW ё CSE дар консентратсияҳои 50, 100 ё 200 µg/mL барои 24 соат илова гардид. Баъд ба ҳар чоҳ 50 µL реактиви MTT илова шуда, дар дар 37°C чор соат реаксия гузаронида шуд, кристаллҳои формазани ҳосилшуда бо 200 µL DMSO ҳал карда шуданд ва абсорбанс дар 540 nm хонда шуд.

Ҳисоби қобилияти ҳаётии ҳуҷайраҳо, ки дар манбаъ истифода шудааст:

\(\text{Hücre canlılığı (\%)}=\frac{A_{\text{örnek grubu}}}{A_{\text{normal grup}}}\times100\)

Формула чиро чен мекунад? Он абсорбанси MTT-и гурӯҳи намунавиро ба абсорбанси гурӯҳи муқаррарии бе LPS нисбат дода, сигнали метаболикии барқароркунии MTT-ро бо фоиз ифода мекунад.

Чаро гурӯҳи муқаррарӣ %100 қабул мешавад? Сигнали гурӯҳи муқаррарӣ, ки ҳамчун махраҷ истифода мешавад, ҳамчун арзиши истинод гирифта мешавад; аз ин рӯ гурӯҳи муқаррарӣ аз ҷиҳати математикӣ ба %100 миқёс карда мешавад.

Маҳдудияти тафсир: Сигнали MTT нишондиҳандаи қобилияти ҳаётии ҳуҷайраҳоест, ки ба қобилияти барқароркунии метаболикии онҳо асос ёфтааст. Мушоҳида нашудани заҳролудии равшан дар консентратсияҳои 50-200 µg/mL танҳо ба хати ҳуҷайравӣ, давомнокии таъсир ва шароити таҷрибавии омӯхташуда дахл дорад.

Манбаъ инчунин қайд мекунад, ки дар ҳуҷайраҳои бе LPS ҳангоми истифодаи CSW ва CSE қобилияти ҳаётии ҳуҷайраҳо аз %98 боло монд; азбаски ин натиҷа ҳамчун “data not shown” гузориш шудааст, графики хоми дахлдор дар манбаъ пешниҳод нашудааст.

Оксиди нитроген чӣ гуна чен карда шуд?

Барои арзёбии истеҳсоли NO ҳуҷайраҳо бо зичии 5×10⁴ cells/well кошта шуда, бо 1 µg/mL LPS як соат ангезонда шуданд ва баъдан бо 50, 100 ё 200 µg/mL CSW/CSE барои 24 соат коркард гардиданд. Аз моеъи фарҳангӣ 100 µL гирифта, бо ҳаҷми баробар, яъне 100 µL реактиви Griess омехта шуд; пас аз 10 дақиқа дар торикӣ ва ҳарорати хона абсорбанс дар 550 nm чен гардид. Миқдори Nitrite аз каҷи стандартии sodium nitrite ҳисоб карда шуд.

LPS истеҳсоли NO-ро нисбат ба гурӯҳи назоратӣ ба таври назаррас зиёд кард. Ҳар ду экстракт истеҳсоли NO-ро вобаста ба консентратсия коҳиш доданд. Дар консентратсияҳои 50 ва 100 µg/mL таъсири коҳишдиҳандаи NO-и CSE аз CSW қавитар буд; дар 200 µg/mL бошад, дар манбаъ байни ду экстракти ҳалкунанда фарқи назаррас зикр нашудааст.

ROS чӣ гуна чен карда шуд?

Намудҳои реактивии оксигени дохили ҳуҷайра бо усули 2′,7′-dichlorofluorescein diacetate (DCF-DA) арзёбӣ шуданд. Ҳуҷайраҳо ба пластинкаи 12-чоҳадор бо зичии 5×10⁵ cells/well кошта шуда; ҳамзамон бо 1 µg/mL LPS, 50, 100 ё 200 µg/mL экстракт истифода шуда, 24 соат инкубатсия гардиданд. Пас аз ду бор шустан бо PBS, ҳуҷайраҳо бо 10 µM DCF-DA дар дар 37°C ва дар торикӣ 30 дақиқа барои реаксия гузошта шуданд.

Дар микроскопи флуоресцентии EVOS M5000 бо бузургкунии 200× тасвирҳо гирифта шуда, флуоресценсия дар хонандаи микропластинкаи Gemini EM дар дарозии мавҷи барангезиш 485 nm ва эмиссия 535 nm ба таври миқдорӣ арзёбӣ шуд. Дар манбаъ Шакли 4 флуоресценсияи сабз сигнали ROS-ро ифода мекунад.

Гурӯҳи LPS нисбат ба гурӯҳи назоратӣ афзоиши қавии ROS-ро нишон дод. CSW ва CSE истеҳсоли ROS-ро вобаста ба консентратсия коҳиш доданд. Махсусан, ҳарфи омории гурӯҳи CSE бо 200 µg/mL бо гурӯҳи назоратии бе LPS яксон буд; муаллифони манбаъ инро ҳамчун ҷавоби қавии фурӯнишонии ROS аз ҷониби CSE дар консентратсияи баланд тафсир карданд.

Чаро тасвири воқеии микроскопияи флуоресцентӣ дар ин ҷо аз нав сохта нашуд?

Тасвирҳои сабзи DCF-DA дар Шакли 4 манбаъ мушоҳидаҳои воқеии фарҳанги ҳуҷайра мебошанд. Ба таври сунъӣ сохтани тасвири монанди чунин микроскопия маънои бозтавлид кардани далели таҷрибавиро надорад. Аз ин рӯ, Verianla микроскопияи манбаъро тақлид намекунад; паёми таҷрибавӣ, тартиби консентратсияҳо ва натиҷаи омории дар манбаъ гузоришшударо бо матн шарҳ медиҳад.

TNF-α ва IL-6 чӣ гуна чен карда шуданд?

Барои ченкунии TNF-α ва IL-6 ҳуҷайраҳо ба пластинкаи 6-чоҳадор ба миқдори 1×10⁶ ҳуҷайра барои ҳар чоҳ кошта шуда, 12-24 соат инкубатсия гардиданд. Пас аз як соат истифодаи 1 µg/mL LPS, ҳар як экстракт дар миқдори 200 µg/mL илова шуда, ҳуҷайраҳо боз 24 соат нигоҳ дошта шуданд. TNF-α ва IL-6 дар моеъи болои фарҳанг бо маҷмӯаҳои mouse DuoSet ELISA чен карда шуданд.

Дар раванди ELISA capture antibody ба пластинка пайваст карда шуда, шустан бо PBS-T ва blocking бо %1 bovine serum albumin гузаронида шуд; пас аз марҳилаҳои намуна, detection antibody ва streptavidin-horseradish peroxidase маҳлули substrate истифода гардид. Реаксия бо 2 N H₂SO₄ қатъ карда шуд; аз абсорбансҳои 450 ва 540 nm бо ёрии каҷи стандартӣ консентратсияи ситокин ҳисоб карда шуд.

Сатҳи TNF-α ҳам бо CSW ва ҳам бо CSE нисбат ба гурӯҳи LPS ба таври назаррас пасттар буд. IL-6 бошад дар гурӯҳи CSE нисбат ба гурӯҳи LPS ба таври назаррас коҳиш ёфт. Бо дарназардошти ҳарфҳои омории шакли манбаъ, фарқи мустақими CSW-CSE набояд барои ҳар як параметр алоҳида тахмин карда шавад.

Усули 2^-ΔΔCt Экспрессияи Генро Чӣ Гуна Муқоиса Мекунад?

Усули 2^-ΔΔCt дар RT-qPCR сатҳи mRNA-и гени ҳадафро нисбат ба гени референсӣ нормализатсия карда, тағйироти нисбии экспрессияро тавассути муқоисаи гурӯҳи таҷрибавӣ бо гурӯҳи калибратор/назоратӣ ҳисоб мекунад. Дар ин таҳқиқот GAPDH ҳамчун гени референсии дохилӣ истифода шуда, сатҳҳои mRNA-и TLR4, MyD88, NF-κB, IL-6, TNF-α, COX-2 ва iNOS арзёбӣ шуданд. Манбаъ танҳо усули ниҳоии 2^-ΔΔCt-ро ба таври возеҳ зикр мекунад; баробариҳои ΔCt ва ΔΔCt дар поён кушодани математикии ҳамин усули стандартӣ мебошанд, на натиҷаи нави таҳқиқот.

1. Нормализатсия:

\(\Delta Ct = Ct_{\text{hedef gen}} - Ct_{\text{GAPDH}}\)

2. Фарқ нисбат ба назорат:

\(\Delta\Delta Ct = \Delta Ct_{\text{örnek}} - \Delta Ct_{\text{kalibratör}}\)

3. Экспрессияи нисбӣ:

\(\text{Göreli ekspresyon} = 2^{-\Delta\Delta Ct}\)

Ct чист? Cycle threshold давраи PCR-ро ифода мекунад, ки дар он сигнали флуоресцентӣ аз ҳадди муайяншуда мегузарад. Вақте ки миқдори ибтидоии кислотаи нуклеинии ҳадаф бештар аст, ҳадд барвақттар гузашта мешавад ва арзиши Ct одатан пасттар мешавад.

Чаро аввал GAPDH тарҳ карда мешавад? Арзиши Ct-и гени ҳадаф метавонад худ аз худ фарқиятҳои шумораи ҳуҷайраҳо, миқдори RNA ё воридоти cDNA-ро дар бар гирад. Гирифтани ΔCt нисбат ба гени референсии GAPDH ҳадаф дорад, ки сигнали ҳадафро ба референси дохилии намуна нормализатсия кунад.

Чаро ΔΔCt лозим аст? Арзиши ΔCt-и намунаи нормализатсияшуда бо арзиши ΔCt-и гурӯҳи калибратор муқоиса карда мешавад. Ҳамин тавр, на танҳо тавозуни ҳадаф/reference, балки то кадом андоза тағйир ёфтани ин тавозун нисбат ба гурӯҳи назоратӣ ҳисоб мешавад.

2^-ΔΔCt чӣ гуна тафсир мешавад? Агар арзиш нисбат ба калибратор тақрибан 1 бошад, экспрессияи нисбӣ бетағйир ҳисоб мешавад; арзиши аз 1 боло афзоиши нисбӣ ва арзиши аз 1 поён коҳиши нисбиро ифода мекунад. Масалан, 0.5 аз ҷиҳати назариявӣ ба экспрессияи нисбӣ дар сатҳи тақрибан нисфи калибратор мувофиқат мекунад. Ин мисол тафсири математикӣ аст; он ченкунии нави гени муайяни таҳқиқот нест.

Фарз чист? Дар тафсири классикии 2^-ΔΔCt муҳим аст, ки амплификатсияҳои ҳадаф ва референс самаранокии мувофиқ ва ба ҳам ба қадри кофӣ наздики PCR дошта бошанд. PDF-и манбаъ праймерҳо ва ҳароратҳои истифодашударо медиҳад, аммо валидасияи ҷудогонаи PCR amplification efficiency-ро гузориш намекунад; аз ин рӯ Verianla тавре рафтор намекунад, ки чунин валидасия анҷом дода шудааст.

Тарҳи таҷрибавии RT-qPCR

Ҳуҷайраҳо ба пластинкаи 6-чоҳадор ба миқдори 1×10⁶ ҳуҷайра барои ҳар чоҳ кошта шуда, 12-24 соат инкубатсия шуданд. Баъдан 1 µg/mL LPS як соат истифода шуда, CSW ё CSE дар консентратсияи 200 µg/mL илова гардид ва боз 24 соат инкубатсия карда шуд. Total RNA бо TRIzol экстраксия шуда, бо NanoDrop 2000 ба таври миқдорӣ арзёбӣ гардид, cDNA бо SuperiorScript III cDNA synthesis kit омода шуд ва таҳлили mRNA бо истифода аз SYBR Green PCR kit гузаронида шуд.

Меҳвари TLR4-MyD88-NF-κB чӣ гуна бояд тафсир шавад?

Дар чаҳорчӯби биологии манбаъ LPS метавонад сигнализатсияи масунияти модарзодии марбут ба TLR4-ро оғоз кунад; MyD88 ҳамчун сафедаи адапторӣ дар интиқоли сигнал дар поёноби роҳ нақш дорад ва NF-κB яке аз омилҳои марказиест, ки транскрипсияи генҳои марбут ба илтиҳобро танзим мекунад. iNOS, COX-2, TNF-α ва IL-6 бошанд ҳадафҳо/медиаторҳои муҳими поёноби ин ҷавоби илтиҳобӣ мебошанд.

Дар RT-qPCR кадом натиҷаҳо ба даст омаданд?

Гурӯҳи LPS нисбат ба гурӯҳи назоратӣ дар экспрессияи mRNA-и iNOS, COX-2, TNF-α ва IL-6 афзоиши назаррас нишон дод. Истифодаи CSW ва CSE экспрессияи ин ҳадафҳои поёнобиро коҳиш дод. Баръакс, дар экспрессияи mRNA-и TLR4, MyD88 ва NF-κB тағйироти назарраси вобаста ба истифодаи экстракт мушоҳида нашуд.

Ин натиҷа фарқгузории муҳимро талаб мекунад: тағйир наёфтани сатҳи mRNA-и NF-κB исбот намекунад, ки фаъолияти сигнализатсияи NF-κB ҳеҷ гуна тағйир наёфтааст; аммо азбаски ин таҳқиқот фаъолияти NF-κB-ро дар сатҳи сафеда/фосфорилатсия/транслокатсияи ҳастаӣ мустақиман чен накардааст, ибораи “фаъолшавии NF-κB қатъиян боздошта шуд” низ аз ҳадди далели мустақими ченкунӣ мегузарад. Натиҷае, ки манбаъ мустақиман нишон медиҳад, коҳиши сатҳҳои mRNA-и генҳои поёнобии марбут ба илтиҳоб аст.

Номувофиқии оморӣ байни Шакли 6 ва хулосаи хаттии таҳқиқот

Дар қисми хулосаи манбаъ гуфта мешавад, ки CSE нисбат ба CSW экспрессияи генҳои IL-6 ва COX-2-ро ба таври назаррас бештар коҳиш додааст. Аммо мувофиқи шарҳи Шакли 6, гурӯҳҳое, ки ҳарфи умумӣ надоранд, дар сатҳи P<0.05 фарқкунанда ҳисоб мешаванд. Дар шакл барои IL-6, CSW “bc” ва CSE “ab”; барои COX-2 низ CSW “bc” ва CSE “ab” нишон дода шудаанд. Дар ҳар ду муқоиса гурӯҳҳо ҳарфи умумии “b” доранд. Аз ин рӯ, рамзгузории омории худи шакл фарқи мустақими CSW-CSE-ро ҳамчун фарқи назаррас ба таври возеҳ дастгирӣ намекунад. Verianla ин зиддиятро ҳамчун ҳалшуда нишон намедиҳад ва иддаои аҳамияти мустақими байни ҳалкунандаҳоро қатъӣ намекунад.

Натиҷаҳои коррелятсияи Pearson чиро нишон доданд?

Байни ROS ва NO коррелятсияи қавии мусбат дар сатҳи r=0.974, P<0.01 гузориш шудааст. Байни ROS ва IL-6 r=0.716, P<0.01, байни ROS ва TNF-α бошад r=0.796, P<0.01 коррелятсияи мусбат гузориш шудааст. Ин натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки дар шароити якхелаи таҷриба нишондиҳандаҳои баландтари стресси оксидшавӣ ҳамроҳ бо нишондиҳандаҳои баландтари марбут ба илтиҳоб тағйир меёбанд.

Бо вуҷуди ин, коррелятсияи Pearson ҳаракати якҷояи тағйирёбандаҳоро чен мекунад; он худ аз худ исбот намекунад, ки яке сабаби мустақими дигаре аст. Масалан, арзиши r=0.974 маънои онро надорад, ки “ROS сабаби %97.4 NO мебошад”.

Оё Ин Натиҷаҳо Таъсири Табобатии Зиддиилтиҳобиро Дар Одамон Исбот Мекунанд?

Не. Таҳқиқот бо иштирокчиёни инсон гузаронида нашудааст ва истифодаи даҳонӣ, фармакокинетика, дастрасии биологӣ, токсикология ё натиҷаи клиникиро арзёбӣ накардааст. Системаи таҷрибавӣ ҳуҷайраҳои макрофагии муши RAW 264.7 ва модели назоратшавандаи in vitro-и илтиҳоб мебошад, ки бо LPS ба вуҷуд оварда шудааст. Аз ин рӯ, натиҷае, ки таҳқиқот дастгирӣ мекунад, ин аст, ки экстрактҳои дар шароити муайяни омодасозии CSW ва CSE гирифташуда метавонанд дар ин модели ҳуҷайравӣ баъзе нишондиҳандаҳои оксидшавӣ ва марбут ба илтиҳобро коҳиш диҳанд; пешгирӣ ё табобати бемориҳои инсон таҳқиқоти клиникии алоҳидаро талаб мекунад.

Натиҷаҳое, ки таҳқиқот дастгирӣ мекунад

• Об ва этанол аз як маводи Cuscutae Semen экстрактҳои дорои хусусиятҳои гуногун ҳосил карданд.
• Ҳосили умумии экстракти хушки экстраксияи обӣ (%12.98) аз экстраксияи этанолӣ (%4.45) баландтар аст.
• Миқдори умумии флавоноид дар CSE аз CSW баландтар аст.
• Ҳар ду экстракт нишондиҳандаҳои баланди безараргардонии радикалҳои DPPH ва ABTS-ро нишон доданд.
• Иқтидори FRAP-и CSE тақрибан 2.8 маротиба аз CSW зиёд аст.
• Байни FRAP ва ченкуниҳои полифеноли умумӣ ва флавоноиди умумӣ коррелятсияҳои қавии мусбат гузориш шуданд.
• Дар таҷрибаҳои ҳуҷайравӣ дар доираи 50-200 µg/mL цитотоксикияти равшан мушоҳида нашуд.
• CSW ва CSE истеҳсоли NO ва ROS-ро, ки бо LPS афзоиш ёфта буд, вобаста ба консентратсия коҳиш доданд.
• Ҳар ду экстракт ҷудошавии TNF-α-ро нисбат ба гурӯҳи LPS коҳиш доданд.
• Экстрактҳо экспрессияи mRNA-и генҳои поёнобии марбут ба илтиҳоб, ба монанди iNOS, COX-2, TNF-α ва IL-6-ро коҳиш доданд.
• Дар экспрессияи mRNA-и TLR4, MyD88 ва NF-κB тағйироти назаррас мушоҳида нашуд.

Натиҷаҳое, ки таҳқиқот дастгирӣ намекунад

• Нишон дода нашудааст, ки экстракти Cuscutae Semen бемориҳои илтиҳобиро дар одамон табобат мекунад.
• Консентратсияи фарҳанги ҳуҷайравии 200 µg/mL вояи истифода барои инсон нест.
• Таҳқиқот омӯзиши бехатарии дарозмуддат ё токсикология нест.
• Фосфорилатсияи сафедаи NF-κB ё транслокатсияи ҳастаии он чен нашудааст.
• Муайян нашудааст, ки кадом як пайвастагии экстракт барои таъсири ҳуҷайравии мушоҳидашуда масъул аст.
• Натиҷаҳои коррелятсия далели сабабият нестанд.
• Азбаски дар манбаъ тасдиқи voucher/DNA-и маводи истифодашуда дар сатҳи намуд гузориш нашудааст, барои маводи таҷрибавӣ набояд қатъияти таксономии берун аз манбаъ сохта шавад.

Усул ва Натиҷаҳои Таҳқиқот

Хулосаи маводи таҷрибавӣ ва экстраксия

Муқоисаи ченкуниҳои кимиёвии антиоксидантӣ

Вояҳо ва давомнокии таҷрибаҳои ҳуҷайравӣ

Хулосаи ба манбаъ содиқи бозёфтҳои ҳуҷайравӣ

Таҳлили оморӣ

Ҳамаи таҷрибаҳо дар ҳамон шароит се маротиба такрор шуда, маълумот ҳамчун миёна±хатои стандартӣ (mean±SE, n=3) пешниҳод гардид. Таҳлили оморӣ бо SPSS version 27.0 анҷом дода шуда, ҳадди аҳамият P<0.05 муайян шуд.

Дар муқоисаи байни ду гурӯҳ Student's t-test истифода шуд. Дар муқоисаҳои чандгурӯҳӣ усули Tukey post-hoc истифода шудааст. Матни методҳои манбаъ номи санҷиши omnibus-ро, ки пеш аз Tukey истифода шудааст, алоҳида намегӯяд; аз ин рӯ Verianla ба таври худкор ибораи “ANOVA истифода шуд”-ро илова намекунад.

Робитаҳои байни тағйирёбандаҳо бо Pearson correlation coefficient арзёбӣ шуданд. Манбаъ инчунин барои баъзе натиҷаҳои коррелятсия P<0.01 медиҳад. Ба +1 наздик шудани коэффисиенти коррелятсия ҳамтағйирии қавии мусбат, ба -1 наздик шудан ҳамтағйирии қавии манфӣ ва ба 0 наздик шудан робитаи хаттии сустро нишон медиҳад; аммо ҳеҷ арзиши r худ аз худ далели сабабият нест.

Ҷиҳатҳои қавии таҳқиқот

Яке аз ҷиҳатҳои муҳими қавии таҳқиқот ин аст, ки таъсири ҳалкунанда танҳо бо як санҷиши кимиёвии антиоксидантӣ арзёбӣ нашуда, натиҷаҳои полифеноли умумӣ, флавоноиди умумӣ, DPPH, ABTS ва FRAP бо таҳлилҳои ҳуҷайравии NO, ROS, ситокин ва mRNA якҷоя карда шудаанд. Ҳамин тавр, дар як таҳқиқот дида шуд, ки интихоби ҳалкунанда ҳам ба натиҷаҳои кимиёвии марбут ба таркиби экстракт ва ҳам ба ҷавобҳои биологӣ дар модели макрофагии бо LPS ангезонидашуда чӣ гуна инъикос меёбад.

Ҷиҳати дуюми қавӣ ин аст, ки натиҷаҳои зиддиилтиҳобии дар ҳуҷайра мушоҳидашуда танҳо ба сатҳи NO ё ROS маҳдуд нашудаанд; TNF-α, IL-6 ва генҳои гуногуни марбут ба илтиҳоб низ чен шудаанд. Ин сохтори бисёрқабата хатари тафсиреро, ки танҳо ба натиҷаи як assay такя мекунад, коҳиш медиҳад.

Маҳдудиятҳои асосӣ

Маҳдудияти якум ва муҳимтарин ин аст, ки таҳқиқот модели in vitro-и ҳуҷайраҳои макрофагии муш мебошад. Натиҷаҳоро мустақиман ба табобати инсон интиқол додан мумкин нест.

Маҳдудияти дуюм ин аст, ки гарчанде манбаъ ва минтақаи ҷамъоварии маводи Cuscutae Semen дода шудааст, дар қисми методҳо тасдиқи сатҳи намуд/voucher specimen гузориш нашудааст.

Маҳдудияти сеюм ин аст, ки гарчанде миқдори умумии полифенол ва флавоноиди экстрактҳо чен шудааст, пайвастагиҳои алоҳидаи кимиёвие, ки барои таъсир масъуланд, дар таҷриба ба таври миқдорӣ ҷудо карда нашудаанд. Манбаъ дар адабиёти қаблӣ аз пайвастагиҳо ба монанди chlorogenic acids, hyperoside, quercetin ва kaempferol ёд мекунад; аммо ин таҳқиқот ҳар яки онҳоро дар экстракти худ бо HPLC/LC-MS ба таври миқдорӣ чен накардааст.

Маҳдудияти чорум ин аст, ки механизми NF-κB бо марҳилаҳои мустақими фаъолшавии сафеда тасдиқ нашудааст. Дар ҳоле ки дар mRNA-и TLR4, MyD88 ва NF-κB тағйироти назаррас дида нашуд, дар генҳои поёнобӣ коҳиш вуҷуд дорад. Фосфорилатсияи NF-κB, деградатсияи IκB, транслокатсияи ҳастаии p65 ё пайвастшавии DNA чен нашудааст.

Маҳдудияти панҷум ин аст, ки гарчанде барои ҳар таҷриба n=3 гузориш шудааст, ба таври муфассал шарҳ дода нашудааст, ки ин такрорҳо партияҳои мустақили экстраксияи биологӣ буданд ё такрорҳои техникӣ/таҷрибавӣ дар ҳамон мавод.

Маҳдудияти шашум мавҷудияти номувофиқии дохилӣ дар воҳид ва баёни ададии полифеноли умумӣ байни Шакли 1-и манбаъ ва матни натиҷаҳо мебошад.

Маҳдудияти ҳафтум номувофиқӣ байни иддаои аҳамияти мустақими CSE-CSW барои IL-6 ва COX-2 дар хулосаи манбаъ ва ҳарфҳои омории Шакли 6 мебошад.

Натиҷа чӣ гуна бояд дуруст тафсир шавад?

Таҳқиқот нишон медиҳад, ки интихоби ҳалкунанда метавонад таркиб ва иҷроиши таҷрибавии экстракти Cuscutae Semen-ро ба таври назаррас тағйир диҳад. Экстраксия бо об ҳосили умумии экстракти баландтар медиҳад, дар ҳоле ки экстраксия бо этанол аз ҷиҳати ҷузъҳои ҳадафии антиоксидантӣ ва махсусан FRAP бартарӣ дорад. Дар модели ҳуҷайравӣ ҳар ду экстракт нишондиҳандаҳои гуногуни оксидшавӣ ва марбут ба илтиҳобро, ки бо LPS баланд шуда буданд, коҳиш доданд ва CSE дар баъзе ченкуниҳо ҷавоби қавитар нишон дод.

Бо вуҷуди ин, аз ин маълумот хулоса баровардан мумкин нест, ки “экстракти этанолӣ дар одамон доруи беҳтари зиддиилтиҳобӣ аст”. Хулосаи дурусти илмии таҳқиқот ин аст, ки экстракти этанолӣ дар шароити лаборатории омӯхташуда барои таҳқиқоти маводи функсионалӣ профили номзади қавитар нишон додааст. Барои истифода дар инсон бехатарӣ, стандартизатсияи пайвастагиҳо, дастрасии биологӣ, муносибатҳои воя-ҷавоб, фармакокинетика ва тасдиқи клиникӣ таҳқиқоти ҷудогонаро талаб мекунанд.

Ёддошт оид ба Манбаъ ва Усул

Унвони аслӣ: Comparison of Antioxidant and Anti-Inflammatory Activities of Cuscutae Semen Extracts with Different Solvents.

Унвони кореягӣ: 용매를 달리한 토사자 추출물의 항산화 및 항염증 활성 비교.

Навъи нашр: Таҳқиқоти таҷрибавӣ, ки дар PDF-и манбаъ ҳамчун “Research Note / 연구노트” нишон дода шудааст.

Муаллифон ва тартиб: Seo-Yeon Yoon, Yu-Jin Heo, Mi-Kyung Lee, Hae-In Lee.

Саҳми баробар: Дар PDF-и манбаъ аломати саҳми баробар ё баёнияи муаллифи якуми баробар дида намешавад.

Муаллифи масъул: Hae-In Lee.

Муассиса: Department of Food and Nutrition, Sunchon National University, Republic of Korea.

Маҷалла: Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition.

Муассисаи нашркунанда: The Korean Society of Food Science and Nutrition.

Ҷилд / шумора / саҳифаҳо: 55(1), 65-73.

Соли нашр ва санаи шумора: 2026; дар сабти библиографӣ 30 Январ 2026.

DOI: 10.3746/jkfn.2026.55.1.65.

Пайванди расмии DOI: https://doi.org/10.3746/jkfn.2026.55.1.65

Санаҳои коркарди мақола: 16 Октябр 2025 гирифта шуд; 17 Ноябр 2025 таҷдиди назар шуд; 17 Ноябр 2025 қабул шуд.

Навъи манбаъ ва эзоҳи рецензия: Таҳқиқот Research Note мебошад, ки дар маҷаллаи академӣ нашр шуда, дар сабтҳои KCI ҳамчун мақолаи маҷалла индексатсия мешавад. Азбаски дар худи PDF ибораи алоҳидаи “peer-reviewed” навишта нашудааст, ин изҳорот бо ҷузъиёти дар манбаъ набуда васеъ карда нашудааст.

Иҷозатнома: PDF-и манбаъ таҳқиқотро ҳамчун дастрасии кушода дар доираи Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (CC BY-NC 4.0) тавсиф мекунад.

Маблағгузорӣ: Дар матни PDF-и баррасишуда баёнияи алоҳидаи маблағгузорӣ муайян нашуд; манбаи маблағгузорӣ фарз карда нашудааст.

Дастрасии маълумот: Дар PDF баёнияи алоҳидаи Data Availability муайян нашуд. Фарз карда нашудааст, ки ченкуниҳои хоми ҳуҷайравӣ, арзишҳои RT-qPCR Ct ё маълумоти хоми графикӣ барои умум дастрасанд.

Бархӯрди манфиатҳо: Дар PDF-и баррасишуда баёнияи алоҳидаи бархӯрди манфиатҳо муайян нашуд; ин ҳолат ба шакли “бархӯрди манфиатҳо вуҷуд надорад” васеъ карда нашудааст.

Саҳми муаллифон: Дар PDF баёнияи алоҳидаи CRediT/саҳми муаллифон дида намешавад.

Номувофиқии муҳими дохили манбаъ 1: Ҳангоме ки усули полифеноли умумӣ ва меҳвари y-и Шакли 1 аз mg GAE/g истифода мекунанд, параграфи натиҷаҳо арзишҳои 340.28 ва 158.31-ро ҳамчун mg RE/g менависад; илова бар ин, таносуби ин рақамҳо бо ибораи “тақрибан 2.4 маротиба” дар матн пурра мувофиқат намекунад. Аз ин рӯ, Verianla воҳид ё арзишро хомӯшона аз нав нанавиштааст.

Номувофиқии муҳими дохили манбаъ 2: Хулосаи манбаъ мегӯяд, ки CSE нисбат ба CSW mRNA-и IL-6 ва COX-2-ро ба таври назаррас бештар коҳиш додааст, аммо дар ҳарфҳои омории Шакли 6 CSW дар гурӯҳи “bc” ва CSE дар гурӯҳи “ab” қарор доранд. Мувофиқи қоидаи шарҳи шакл, ки “гурӯҳҳои бе ҳарфи умумӣ ба таври назаррас фарқ мекунанд”, фарқи мустақими CSE-CSW-ро аз ин шакл қатъӣ кардан мумкин нест.

Маҳдудияти асосии методологӣ: Таҳқиқот аз санҷишҳои кимиёвии антиоксидантӣ ва таҷрибаҳои in vitro дар ҳуҷайраҳои макрофагии муши RAW 264.7, ки бо LPS ангезонда шудаанд, иборат аст; он таҳқиқоти самаранокии клиникӣ, бехатарӣ ё воя дар одамон нест.