Utafiti huu wa uchunguzi wa awali unachunguza chembe zinazofanana na mikroplastiki (chembe zinazofanana na MP) zilizotambuliwa katika mkojo wa watu wazima wenye afya kwa kutumia hadubini ya fluorescence ya Nile Red/DAPI. Katika utafiti huu, chembe inayofanana na MP ni aina ya chembe inayotoa fluorescence kwa Nile Red lakini haijatambuliwa kama mabaki ya kibaolojia kwa DAPI, na utambulisho wake wa polima haujathibitishwa kando kwa mbinu kama μFTIR au Raman. Watu wazima 30 wenye afya walijumuishwa katika utafiti, sampuli 59 za mkojo zilikusanywa, na sampuli 53 zilizokidhi vigezo vya ubora wa kiufundi zilichambuliwa. Katika sampuli 53, chembe zinazofanana na MP ziligunduliwa katika 48 kati yake. Hakukuwa na tofauti yenye maana kati ya wanawake na wanaume; kwa wanawake kulionekana mwelekeo wa mkusanyiko wa chini wakati wa hedhi, lakini tofauti hiyo haikufikia kiwango cha umuhimu wa kitakwimu.

Katika sampuli zilizoweza kutathminiwa, mediani ya jumla ya mkusanyiko wa chembe zinazofanana na MP ilikuwa 0,7 chembe/mL, na vipimo vilionyesha utofauti mpana kati ya 0 na 15,2 chembe/mL. Kwa wanawake mediani ilikuwa 0,6 chembe/mL, kwa wanaume 0,4 chembe/mL, na tofauti haikuwa na maana (p=0,593). Wakati wa hedhi mediani ilikuwa 0,1 chembe/mL, na katika kipimo cha nje ya hedhi ilikuwa 1,1 chembe/mL, lakini ulinganisho haukupita kizingiti cha umuhimu kwa p=0,076.

Katika modeli za mstari ambamo vigezo vilivyopatikana kutoka dodoso za mtindo wa maisha na mfiduo binafsi vilichunguzwa kimoja baada ya kingine, hakuna kigezo kilichofikia kiwango cha kawaida cha umuhimu wa kitakwimu. Ishara yenye nguvu zaidi ya kigezo kimoja ilionekana kwa matumizi ya pedi za usafi (p=0,054). Baadaye, modeli ya uchunguzi ya hatua kwa hatua katika pande mbili yenye vigezo vingi ilichagua matumizi ya pedi za usafi, kunyoa sehemu za siri hivi karibuni/mara kwa mara, na mbinu za kutengeneza kahawa zenye vipengele vya plastiki kwa mwelekeo chanya; na matumizi ya chumvi ya bahari pamoja na unywaji wa vinywaji vilivyofungwa kwenye katoni mchanganyiko kwa mwelekeo hasi. Ingawa modeli ilikuwa na R²=0,361 na p ya jumla <0,001, waandishi wanaeleza wazi kuwa uchambuzi huu ni wa kuzalisha dhana.

Kizuizi kikuu cha utafiti ni kwamba utambulisho wa polima wa chembe zilizopimwa haujathibitishwa. Kwa sababu Nile Red hupaka rangi vitu vya haidrofobiki, inakubaliwa kuwa baadhi ya chembe zinazofanana na MP zinaweza kwa kweli kuwa nyenzo zisizo za plastiki. Sampuli ndogo ya majaribio, ukubwa mdogo wa kundi dogo la mzunguko wa hedhi, utegemezi wa vigezo vya dodoso kwenye taarifa binafsi, na kutoweza kutenganisha mfiduo wa kimfumo na uchafuzi wa ndani pia hupunguza uwezekano wa kujumlisha matokeo.

Swali kuu la utafiti

Mikro- na nanoplastiki zinaweza kuingia katika mwili wa binadamu kupitia njia mbalimbali kama mfumo wa mmeng'enyo wa chakula, njia ya upumuaji na mgusano wa ngozi. Ingawa tafiti za awali zimeripoti nyenzo hizi katika tishu na vimiminika mbalimbali vya mwili, taarifa kuhusu utolewaji kupitia mkojo, utofauti wa muda mfupi na mahusiano yanayowezekana na tabia za kila siku za maisha bado ni chache.

Lengo la utafiti huu ni kuchunguza viwango vya chembe zinazofanana na MP katika mkojo wa watu wazima wenye afya na kutathmini kwa uchunguzi maswali matatu makuu: iwapo kuna tofauti kati ya wanawake na wanaume, iwapo kwa wanawake mkusanyiko hubadilika kulingana na awamu ya mzunguko wa hedhi, na iwapo historia ya hivi karibuni ya maambukizi ya njia ya mkojo pamoja na vigezo vya mtindo wa maisha/usafi binafsi vinahusiana na viwango vya chembe vilivyopimwa.

Utafiti huu si utafiti wa mfiduo wa kisababishi. Hakukuwa na ulinganishaji wa kikemia au ufuatiliaji wa chanzo ambao ungeonyesha kuwa chembe iliyo katika mkojo wa mtu ilitoka moja kwa moja kwenye bidhaa fulani aliyotumia.

“Chembe Inayofanana na MP” Inamaanisha Nini Katika Utafiti Huu?

Chembe inayofanana na MP katika utafiti huu inamaanisha chembe inayoonyesha fluorescence ya Nile Red na ambayo haijaondolewa kama nyenzo ya kibaolojia katika picha inayolingana ya DAPI. Uainishaji huu unatokana na tabia ya fluorescence; kwa kuwa muundo wa polima wa chembe haujathibitishwa kwa μFTIR, spektroskopia ya Raman au mbinu nyingine maalum ya polima, si sawa na kusema “mikroplastiki iliyothibitishwa kwa uhakika”.

Kwa nini istilahi ya tahadhari inahitajika badala ya kusema “mikroplastiki”?

Nile Red hupaka rangi nyenzo za haidrofobiki. Plastiki zinaweza kutoa fluorescence kwa sababu ya sifa hii; hata hivyo, lipidi, protini za haidrofobiki au vipengele vingine visivyo vya plastiki vinaweza pia kutoa ishara. Upakaji rangi wa kukinzana wa DAPI husaidia kuchuja mabaki ya kibaolojia yenye kiini cha seli, lakini hautambui utambulisho wa polima.

Kwa hiyo, hitimisho lenye nguvu zaidi la utafiti si kwamba “polima maalum za plastiki zimethibitishwa kikemia kwa uhakika katika mkojo wa binadamu”. Kauli salama ni kwamba kwa mbinu ya uchunguzi iliyotumiwa, chembe za fluorescence zinazofanana na MP ziligunduliwa katika sampuli nyingi za mkojo zilizoweza kutathminiwa.

Muundo wa utafiti

Utafiti ulipangwa kama utafiti wa uchunguzi wa awali wenye vipimo vinavyorudiwa. Watu wazima 30 wenye afya walichaguliwa kutoka miongoni mwa wafanyakazi wa Medical University of Graz na CBmed GmbH. Uandikishaji wa washiriki ulifanyika kati ya 19 Septemba 2023 na 21 Novemba 2023.

Vigezo vya ushiriki vilikuwa kuwa na umri wa miaka 18 au zaidi, kukubali kujibu maswali binafsi katika dodoso la kielektroniki, na kutoa sampuli za mkojo zinazorudiwa. Watu wenye katheta ya kudumu ya mkojo, wenye ugonjwa wa sasa au wa zamani wa mfumo wa mkojo isipokuwa maambukizi ya njia ya mkojo, wasioweza kutoa sampuli ya mkojo au wasioweza kutoa ridhaa ya ufahamu waliondolewa kwenye utafiti.

Utafiti uliidhinishwa na kamati ya maadili ya Medical University of Graz kwa namba 35-161ex22/23, na ridhaa iliyoandikwa baada ya kufahamishwa ilipatikana kutoka kwa washiriki wote.

Kwa nini sampuli mbili zilikusanywa?

Kwa washiriki wanawake, sampuli moja ilipangwa wakati wa hedhi na nyingine nje ya hedhi ili kuchunguza mabadiliko ya muda mfupi yanayohusiana na awamu ya mzunguko ndani ya mtu yuleyule. Sampuli mbili katika nyakati tofauti pia zilichukuliwa kutoka kwa wanaume; nyakati za kuchukua sampuli kwa wanaume ziliamuliwa kwa nasibu.

Muundo wa vipimo vinavyorudiwa huruhusu kuona si tu tofauti kati ya watu bali pia utofauti kati ya vipimo vya mtu yuleyule katika nyakati tofauti. Utafiti chanzo kwa kweli unaripoti utofauti dhahiri wa mkusanyiko wa chembe ndani ya mtu yuleyule na kati ya nyakati tofauti.

Ukubwa wa sampuli uliamuliwaje?

Kwa kuwa huu ulikuwa utafiti wa majaribio, hakukuwa na hesabu rasmi ya awali ya ukubwa wa sampuli ya kitakwimu. Watafiti waliamua ukubwa wa sampuli kwa kuzingatia ukosefu wa data za awali, uwezekano wa kutekeleza utafiti na rasilimali zilizokuwepo. Hali hii hasa hupunguza nguvu ya kitakwimu ya uchambuzi wa makundi madogo.

Uchafuzi ulipunguzwaje wakati wa ukusanyaji wa sampuli?

Katika tafiti za mikroplastiki, uchafuzi wa nje unaotoka kwenye mazingira au vifaa vya maabara ni mojawapo ya hatari kuu za kimetodolojia. Kwa hiyo, vifaa visivyo na plastiki vilitumika katika hatua za kabla ya uchambuzi, mkojo ulikusanywa katika vyombo vya kioo, na vyombo vilifungwa mara moja ili kupunguza uchafuzi wa nje.

Kutoka kila sampuli, 9 mL ilitengwa na kugandishwa katika -80 °C, na sehemu iliyobaki ilichakatwa kwa ajili ya uchambuzi wa chembe zinazofanana na MP. Uandaaji wa sampuli ulifanywa kwa makundi ya sampuli 3-5, na kila kundi lilijumuishiwa sampuli tupu ya utaratibu yenye 150 mL ya maji ya Milli-Q yaliyopitia mchakato huohuo. Mkusanyiko wa chembe uliopatikana katika sampuli tupu za utaratibu baadaye ulitolewa kutoka kwenye thamani za sampuli husika.

Usafishaji kwa peroksidi ya hidrojeni

Ili kupunguza mzigo wa nyuzi za kibaolojia na protini, sampuli zilitibiwa kwa peroksidi ya hidrojeni iliyochujwa awali kwa uwiano wa 2:1. Usafishaji ulifanywa katika 56 °C chini ya mtikisiko endelevu wa 130 rpm na uliendelea kwa 48 saa.

Katika dakika 30 za mwisho za usafishaji, suluhisho la akiba la %1 Nile Red liliongezwa. Suluhisho la akiba lilitayarishwa kwa kuyeyusha 1 mg/mL Nile Red katika asetoni.

Uchujaji na upakaji rangi wa kukinzana wa DAPI

Sampuli zilizotakaswa zilipitishwa kupitia utando uliopakwa dhahabu wa 3 µm kulingana na sehemu ya mbinu ya kina ili kunasa chembe. Vichujio vilioshwa mara tatu kwa maji ya Milli-Q ili kuondoa Nile Red ya ziada.

Baadaye, upakaji rangi wa kukinzana ulifanywa kwa suluhisho la 300 nM DAPI/PBS. Kila kichujio kiliwekewa 1 mL ya suluhisho la DAPI, kikaachwa kwa dakika 5 katika hali isiyopenyeza mwanga, kisha kikaoshwa mara tatu kwa PBS iliyochujwa awali.

Dokezo la ulinganifu wa chanzo: Katika sehemu ya muhtasari ukubwa wa kichujio unaonekana kama “3 mm”, huku katika sehemu ya mbinu ya kina ukitolewa kama “3 µm”. Maelezo ya kiufundi hapa yanafuata thamani ya 3 µm katika sehemu ya mbinu ya kina.

Nile Red na DAPI Zilitumiwaje Pamoja?

Nile Red ilifanya chembe za haidrofobiki zionekane katika chaneli ya FITC, huku DAPI ikitumika kutambua mabaki ya kibaolojia yenye asidi nukleiki. Watafiti kwanza walitambua chembe iliyoonekana katika chaneli ya FITC kama chembe inayoweza kufanana na MP, kisha wakakagua picha ya DAPI katika nafasi ileile; nyenzo chanya kwa DAPI au chanya kwa Nile Red na DAPI kwa pamoja ziliondolewa katika darasa la MP-mfanano.

Hadubini ya fluorescence

Uchambuzi ulifanywa katika Graz Center for Medical Research Bioimaging and Flow Cytometry Core Facility kwa kutumia hadubini iliyogeuzwa ya mfululizo wa Nikon Eclipse Ti2.

• Chaneli ya FITC: msisimko wa 470 nm, utoaji wa 515 nm; uonyeshaji wa chembe zinazoweza kuwa kandidati zilizopakwa Nile Red.
• Chaneli ya DAPI: msisimko wa 395 nm, utoaji wa 432 nm; utambuzi wa nyenzo ya kibaolojia.

Mfumo wa high-content screening uliunganisha picha nyingi katika kichujio chote ili kutoa uchunguzi wa jumla wa azimio la juu. Kila kichujio kiligawanywa katika maeneo 16 sawa na maeneo hayo yalichunguzwa kwa kujitegemea. Uainishaji na uhesabuji wa chembe ulifanywa kwa mikono.

Kielelezo 1 cha chanzo kinaonyesha picha zinazolingana za chembe zilezile katika chaneli za FITC na DAPI. Jozi A/B inaonyesha chembe ya 21,31 µm inayofanana na MP iliyo chanya kwa Nile Red; jozi C/D inaonyesha nyenzo ya 34,9 µm iliyo chanya kwa DAPI; na jozi E/F inaonyesha nyenzo ya 68,25 µm iliyo chanya kwa Nile Red na DAPI kwa pamoja. Madarasa ya pili na ya tatu yaliondolewa katika uhesabuji wa chembe zinazofanana na MP.

Kwa nini sampuli sita hazikuweza kuchambuliwa?

Katika sampuli sita kati ya 59 za mkojo zilizokusanywa, mabaki mengi ya kibaolojia yalibaki baada ya uchujaji. Watafiti wanahusisha tatizo hili na fluorescence kali ya usuli iliyoweza kusababishwa na lipidi au mabaki mengine ya kikaboni yaliyobaki baada ya mmeng'enyo usiotosha wa H₂O₂. Kwa sababu ishara ya chembe haikuweza kutenganishwa kwa kuaminika na usuli katika sampuli kama hizi, uchambuzi haukufanywa.

Uchambuzi wa kitakwimu

Data za kliniki na dodoso zilikusanywa kupitia REDCap, zikasafirishwa katika umbizo la CSV na kuchambuliwa katika RStudio. Sifa za kohorti zilifupishwa kwa mediani na vipindi vya kujiamini vya %95.

Katika ulinganisho wa jinsia, historia ya maambukizi ya njia ya mkojo katika miaka mitatu iliyopita na hali ya mzunguko wa hedhi, majaribio yasiyo ya kiparametriki ya Wilcoxon yaliyooanishwa au yasiyooanishwa yalitumika inapofaa.

Vigezo vya dodoso vilibadilishwa kuwa viashiria vya jozi vya mfiduo, na katika uchunguzi wa awali modeli tofauti ya regresha ya mstari iliundwa kwa kila kigezo. Marekebisho ya Benjamini-Hochberg yalitumika kwa thamani za p kwa ajili ya ulinganisho mwingi.

Vigezo vilivyoonyesha ishara yenye nguvu zaidi ya kitakwimu baadaye viliingizwa katika regresha ya hatua kwa hatua ya pande mbili kwa lengo la kuzalisha dhana, na modeli ya mwisho ilisanifishwa kabla ya kutafsiriwa.

Sifa kuu za kohorti

Sampuli ngapi zilitathminiwa?

Kati ya washiriki thelathini, 29 walikamilisha ziara zote mbili za utafiti, na mtu mmoja alitoa sampuli moja tu na dodoso moja. Kati ya jumla ya sampuli 59 za mkojo, sita ziliondolewa kwa sababu za kiufundi.

Uchambuzi wa mwisho ulihusisha washiriki 29 na sampuli 53 zilizotoka kwao. Washiriki ishirini na wanne walichangia sampuli mbili, na washiriki watano sampuli moja. Mgawanyo wa mwisho wa washiriki ulikuwa wanawake 15 na wanaume 14.

Mbinu na Matokeo ya Utafiti

Chembe zinazofanana na MP zilipatikana mara ngapi?

Katika sampuli 53 zilizoweza kuchambuliwa, chembe zinazofanana na MP ziligunduliwa katika 48 kati yake. Kiwango hiki ni takriban %90,6.

Katika sampuli zote zilizoweza kutathminiwa, mkusanyiko wa mediani uliripotiwa kuwa 0,7 chembe/mL; masafa yaliyoonekana yalikuwa 0-15,2 chembe/mL. Katika sehemu ya majadiliano, thamani ya wastani 0,67 chembe/mL na masafa 0-15,15 chembe/mL pia yametolewa kando.

Usambazaji huu mpana unaonyesha kuwa kulikuwa na utofauti mkubwa kati ya watu na pia kati ya nyakati tofauti za kuchukua sampuli kwa mtu yuleyule.

Je, kulikuwa na tofauti kati ya washiriki wanawake na wanaume?

Matokeo ya p=0,593 hayaonyeshi tofauti yenye maana ya kitakwimu kati ya wanawake na wanaume. Sehemu ya majadiliano ya utafiti chanzo pia inaeleza wazi kwamba hakuna tofauti iliyogunduliwa kati ya jinsia.

Je, Chembe Zinazofanana na MP Zilipungua Kweli Wakati wa Hedhi?

Utafiti uliona mwelekeo wa mkusanyiko wa chini wakati wa hedhi, lakini tofauti haikufikia kiwango cha umuhimu wa kitakwimu. Katika kundi dogo la wanawake, mediani wakati wa hedhi ilikuwa 0,1 chembe/mL, na nje ya hedhi 1,1 chembe/mL, huku ulinganisho ukitoa p=0,076; kwa hiyo data haithibitishi kwamba “hedhi hupunguza chembe zinazofanana na MP katika mkojo”.

Katika Kielelezo 2B cha chanzo, inaonekana kuwa nukta za mtu mmoja mmoja zimesambaa kwa kiasi kikubwa na kuna thamani za juu katika kundi la nje ya hedhi. Kwa sababu uchambuzi mdogo unategemea sampuli zinazolingana za wanawake wanane tu, nguvu ya kitakwimu na uwakilishi ni mdogo.

Je, utaratibu uliopendekezwa kwa mzunguko wa hedhi ulithibitishwa?

Hapana. Waandishi wanajadili maelezo ya kifiziolojia kama uwezekano kwamba kukojoa mara nyingi zaidi kunaweza kupunguza muda ambao chembe hukaa katika mfumo wa mkojo; hata hivyo, utafiti haukupima moja kwa moja marudio ya kukojoa, upitishaji wa chembe au mnyororo wa kisababishi wa utaratibu huu.

Kwa hiyo, maelezo haya si utaratibu uliopimwa, bali ni dhana inayolenga kutafsiri mwelekeo ulioonekana kwa ajili ya tafiti za baadaye.

Uhusiano na historia ya maambukizi ya njia ya mkojo

Washiriki sita waliripoti kuwa walikuwa na maambukizi ya njia ya mkojo katika miaka mitatu iliyopita; wanne walikuwa wanawake na wawili wanaume.

Kwa sababu p=0,156, hakuna tofauti yenye maana iliyopatikana kati ya waliokuwa wameripoti UTI katika miaka mitatu iliyopita na wale ambao hawakuripoti. Aidha, kwa kuwa historia ya maambukizi ilitegemea taarifa binafsi na kukumbuka yaliyopita, kuna pia uwezekano wa upendeleo wa kumbukumbu.

Vigezo vya dodoso: uchunguzi wa kigezo kimoja

Tabia za kila siku, mifumo ya matumizi, mavazi na vigezo vya usafi binafsi vilichunguzwa katika modeli tofauti za mstari. Chanzo kinaeleza wazi kwamba hakuna kigezo kimoja kilichoonyesha uhusiano wa mstari wenye maana ya kitakwimu. Thamani za chini zaidi za p ziliripotiwa tu ili kuonyesha mielekeo inayopaswa kujaribiwa baadaye.

Jedwali hili linapaswa kutafsiriwa kwa tahadhari maalum. Kwa mfano, kuwa na mgawo hasi kwa matumizi ya chumvi ya bahari au katoni mchanganyiko hakumaanishi kwamba vitu hivyo ni “kinga” dhidi ya mikroplastiki. Vivyo hivyo, mgawo chanya wa vigezo vya pedi za usafi au kunyoa hauonyeshi kwamba tabia hizi husababisha moja kwa moja mikroplastiki katika mkojo.

Ni Vigezo Gani vya Mtindo wa Maisha Vilivyojitokeza Katika Modeli Yenye Vigezo Vingi?

Modeli ya uchunguzi ya hatua kwa hatua katika pande mbili ilichagua vigezo vitano: matumizi ya pedi za usafi, marudio/ukaribu wa kunyoa sehemu za siri, na mbinu za kutengeneza kahawa zenye vipengele vya plastiki vilihusishwa kwa mwelekeo chanya na mkusanyiko wa chembe zinazofanana na MP; matumizi ya chumvi ya bahari na unywaji wa vinywaji katika katoni mchanganyiko vilikuwa kwa mwelekeo hasi. Modeli ilieleza %36,1 ya utofauti (R²=0,361; p ya jumla <0,001), lakini kwa sababu ya sampuli ndogo ya majaribio na uteuzi wa vigezo unaoongozwa na data, matokeo haya si sababu zilizothibitishwa wala modeli ya utabiri inayoweza kujumlishwa, bali ni dhana zinazopaswa kujaribiwa baadaye.

Matumizi ya pedi za usafi

Matumizi ya pedi za usafi yalionyesha mwelekeo wenye nguvu zaidi katika uchambuzi wa kigezo kimoja kwa p=0,054 na yalibaki katika mwelekeo chanya katika modeli ya uchunguzi yenye vigezo vingi.

Chanzo kinajadili njia zinazowezekana za uchafuzi wa ndani au mfiduo kwa sababu bidhaa za usafi zinaweza kuwa na plastiki na ziko karibu kianatomia. Hata hivyo, njia ya moja kwa moja ya MP kupita kutoka pedi ya usafi kwenda mfumo wa mkojo kwa binadamu haikupimwa katika utafiti huu.

Kunyoa sehemu za siri

Kunyoa sehemu za siri hivi karibuni na mara kwa mara kulichaguliwa katika mwelekeo chanya katika modeli yenye vigezo vingi. Waandishi wanajadili uwezekano kama mikato midogo ya ngozi, bidhaa za utunzaji binafsi zinazotumiwa au uchafuzi wa ndani wakati wa kuchukua sampuli.

Hata hivyo, utafiti haukuonyesha utaratibu wa moja kwa moja wa kibaolojia wa upitishaji kati ya kunyoa na kiwango cha MP katika mkojo. Kigezo hiki pia kinawasilishwa na chanzo kama sababu inayowezekana ambayo inapaswa kutathminiwa katika tafiti za baadaye.

Utengenezaji wa kahawa wenye vipengele vya plastiki

Mbinu za kutengeneza kahawa aina ya kapsuli au kichujio zinazotumia vipengele vya plastiki zilionekana kwa mwelekeo chanya katika modeli ya uchunguzi ikilinganishwa na chaguo zisizo na plastiki kama French press au moka pot.

Hata hivyo, data za dodoso hazikupima kwa njia ya kikemia au ya kiasi dozi halisi ya chembe ya mtu. Kwa hiyo, haiwezekani kulinganisha chanzo cha chembe maalum zinazotoka katika vifaa vya kutengeneza kahawa na chembe maalum zinazoonekana katika mkojo.

Kwa nini matokeo ya chumvi ya bahari na katoni mchanganyiko yanapaswa kutafsiriwa kwa tahadhari?

Matumizi ya chumvi ya bahari na unywaji wa vinywaji katika katoni mchanganyiko yalionekana katika modeli yakiwa na migawo hasi. Matokeo haya hayalingani moja kwa moja na matarajio ya awali ya mfiduo.

Waandishi wanaeleza kuwa matumizi ya chumvi ya bahari hayakupimwa kwa kiasi katika dodoso; aina ya kifungashio, kemia ya kinywaji, lishe kwa ujumla, tabia za unywaji wa maji na tabia za watumiaji ambazo hazikupimwa zinaweza kuathiri matokeo. Kwa hiyo, migawo hasi haithibitishi kwamba bidhaa yoyote hupunguza mfiduo wa MP.

Thamani iliyopimwa inatoka wapi: mfiduo wa kimfumo au uchafuzi wa ndani?

Moja ya vikwazo muhimu vya utafiti ni kutoweza kutenganisha vyanzo hivi viwili. Chembe zinazofanana na MP katika mkojo zinaweza kinadharia kuathiriwa na usambazaji wa kimfumo baada ya mmeng'enyo au kuvuta pumzi, michakato katika mfumo wa mkojo, vyanzo vya ndani baada ya mgusano wa sehemu za siri/ngozi, au uchafuzi wa nje wakati wa ukusanyaji wa sampuli.

Ingawa sampuli tupu za utaratibu zilitumiwa katika utafiti na jitihada zilifanywa kupunguza uchafuzi wa maabara, haiwezekani kutenganisha kabisa uchafuzi wa ngozi au utando wa ute ambao unaweza kutokea kabla sampuli haijafika kutoka mwilini mwa mtu hadi kwenye chombo cha sampuli.

Nguvu za utafiti

• Kuchukua sampuli zinazorudiwa kutoka kwa mtu yuleyule huruhusu kuchunguza utofauti wa muda mfupi.
• Vyombo vya kioo na vifaa visivyo na plastiki vilitumika katika ukusanyaji wa sampuli.
• Sampuli tupu ya utaratibu ilitumika katika kila kundi la uandaaji na thamani za tupu zilitolewa kutoka kwenye sampuli.
• Ishara ya Nile Red ilitathminiwa pamoja na upakaji rangi wa kukinzana wa DAPI ili kujaribu kuondoa baadhi ya chanya za uwongo za kibaolojia.
• Kichujio chote kilichanganuliwa kwa high-content screening na kutathminiwa kwa mikono katika maeneo 16.
• Jinsia, mzunguko wa hedhi, historia ya UTI na idadi kubwa ya vigezo vya mfiduo binafsi vilichunguzwa kwa uchunguzi ndani ya muundo huo huo wa majaribio.

Vikwazo vikuu vya utafiti

• Hakukuwa na uthibitishaji maalum wa polima; sehemu ya chembe zinazofanana na MP inaweza kuwa nyenzo za haidrofobiki zisizo za plastiki.
• Hakukuwa na hesabu rasmi ya ukubwa wa sampuli kwa utafiti huu wa majaribio.
• Uchambuzi wa mwisho unajumuisha washiriki 29 tu na sampuli 53 zinazoweza kutathminiwa.
• Kundi dogo linalolingana kwa ulinganisho wa kipindi cha hedhi ni dogo.
• Vigezo vya dodoso vinategemea taarifa binafsi na havipimi kwa kiasi dozi halisi za mfiduo.
• Modeli ya hatua kwa hatua yenye vigezo vingi ni ya kuzalisha dhana na haijajaribiwa katika kohorti huru ya uthibitishaji.
• Mfiduo wa kimfumo, uchafuzi wa ndani na uhamisho wa sampuli haviwezi kutenganishwa.
• Historia ya maambukizi ya njia ya mkojo inategemea taarifa binafsi za nyuma.
• Sampuli sita hazikuweza kuchambuliwa kwa sababu ya mabaki mengi ya kibaolojia na fluorescence ya usuli.
• Wajitolea wenye afya walitoka katika mazingira ya Medical University of Graz na CBmed; matokeo hayawezi kujumlishwa moja kwa moja kwa idadi ya watu kwa ujumla.

Matokeo yanayoungwa mkono na utafiti

Utafiti unaunga mkono kwamba kwa mtiririko wa kazi wa fluorescence wa Nile Red/DAPI uliotumiwa, chembe zinazofanana na MP zinaweza kuonekana katika sampuli nyingi za mkojo zinazoweza kutathminiwa. Pia unaonyesha kwamba vipimo vinaweza kutofautiana kwa kiasi kikubwa kati ya watu na nyakati tofauti.

Data haionyeshi tofauti yenye maana kati ya wanawake na wanaume. Kuna ishara ya mkusanyiko wa chini wakati wa hedhi, lakini kwa kuwa p=0,076, haipaswi kukubaliwa kama athari ya mzunguko wa hedhi iliyothibitishwa. Pia hakuna uhusiano wenye maana uliopatikana na historia ya awali ya UTI.

Vigezo vitano vya mtindo wa maisha/usafi vilijitokeza katika modeli ya uchunguzi yenye vigezo vingi, lakini si vyanzo vya mfiduo vilivyothibitishwa wala sababu.

Matokeo ambayo utafiti hauungi mkono

Utafiti huu hauthibitishi kwamba kila chembe ya fluorescence iliyopatikana ni plastiki kwa uhakika. Hauonyeshi kwamba pedi fulani, mashine ya kahawa, tabia ya kunyoa, aina ya chumvi au kifungashio cha kinywaji ni chanzo cha moja kwa moja cha chembe zinazofanana na MP katika mkojo.

Utafiti hauthibitishi kwamba hedhi huondoa mikroplastiki mwilini; hauonyeshi kwamba mzigo wa kimfumo wa mikroplastiki hutofautiana kati ya wanaume na wanawake; hauthibitishi kwamba kiwango cha chembe zinazofanana na MP husababisha UTI au kwamba UTI hubadilisha kiwango cha chembe.

Utafiti pia haujaamua viwango vya mkusanyiko wa chembe vilivyoonekana vinahusiana na kiwango gani cha hatari ya kliniki kwa afya ya binadamu. Utafiti huu wa majaribio hautoi kizingiti cha hatari ya ugonjwa au matibabu.

Maelezo ya Chanzo na Mbinu

Kichwa asilia: Microplastic in Human Urine: Early Observations and potential Influencing factors

Waandishi: Daniel Habich; Christian Pacher-Deutsch; Johannes Woltsche; Markus Absenger-Novak; Angela Horvath; Vanessa Stadlbauer.

Waandishi wenza wa kwanza: Daniel Habich na Christian Pacher-Deutsch.

Mwandishi wa mawasiliano: Vanessa Stadlbauer.

Taasisi: Center for Biomarker Research in Medicine, Graz; Department of Gastroenterology and Hepatology, Medical University of Graz; Department of Dermatology, Medical University of Graz; Center for Medical Research, Core Facility Bioimaging, Medical University of Graz; BioTechMed-Graz.

Jukwaa: SSRN.

Aina ya chanzo: Utafiti wa uchunguzi wa awali wa binadamu wenye vipimo vinavyorudiwa; preprint.

Tarehe ya kuwasilishwa SSRN: 7 Oktoba 2026.

Namba ya rekodi ya SSRN: 7577027.

DOI: 10.2139/ssrn.7577027.

Hali ya mapitio: Chanzo kilichopakiwa kinaeleza wazi kwamba utafiti bado haujapitia mapitio ya kitaalamu.

Sampuli kuu: Watu wazima 30 wenye afya; washiriki wa mwanzo wanawake 15 na wanaume 15. Jumla ya sampuli 59 za mkojo zilikusanywa, sampuli 53 zikaonekana zinaweza kuchambuliwa; data ya mwisho inayoweza kutathminiwa ni ya washiriki 29.

Mbinu kuu ya uchambuzi: Usafishaji wa sampuli kwa H₂O₂, upakaji wa Nile Red, upakaji wa kukinzana wa DAPI, uchujaji kwa utando uliopakwa dhahabu wa 3 µm, hadubini ya fluorescence ya Nikon Eclipse Ti2, uchunguzi wa chaneli mbili wa FITC/DAPI na uainishaji wa chembe kwa mikono.

Takwimu: Mediani na vipindi vya kujiamini vya %95; majaribio ya Wilcoxon yaliyooanishwa/yasiyooanishwa; uchunguzi wa regresha ya mstari kwa vigezo vya dodoso; marekebisho ya majaribio mengi ya Benjamini-Hochberg; regresha ya hatua kwa hatua ya pande mbili yenye vigezo vingi kwa ajili ya kuzalisha dhana.

Kizuizi kikuu cha kimetodolojia: Utambulisho maalum wa polima wa chembe haujathibitishwa. Kwa hiyo, matokeo si hesabu ya uhakika ya mikroplastiki, bali ni vipimo vya chembe zinazofanana na MP zilizotambuliwa kwa mtiririko wa kazi wa Nile Red/DAPI.

Kutofautiana kwa kiufundi ndani ya chanzo: Katika sehemu ya muhtasari, kichujio kilichopakwa dhahabu kimeandikwa 3 mm, huku mbinu ya kina ikitoa 3 µm. Thamani ya mbinu ya kina imehifadhiwa katika maelezo ya mbinu.

Kutofautiana kwa tafsiri ndani ya chanzo: Kauli kuhusu athari ya jinsia/UTI katika sehemu ya matokeo haiendani na thamani za p=0,593 na p=0,156 katika matokeo makuu. Maelezo ya Verianla yanategemea matokeo ya kiasi na yanaonyesha ulinganisho huu kuwa hauna umuhimu.

Maadili: Idhini ya kamati ya maadili ya Medical University of Graz 35-161 ex 22/23; ridhaa iliyoandikwa baada ya kufahamishwa ilipatikana kutoka kwa washiriki wote.

Ufadhili: Ulifadhiliwa chini ya programu ya COMET Module na BMWET, BMIMI, Land Steiermark/SFG na Land Wien/WAW; programu iliendeshwa na Austrian Research Promotion Agency (FFG). Namba ya mradi ni 888339.

Upatikanaji wa data: Data zinazounga mkono matokeo ya utafiti zinaweza kupatikana kutoka kwa mwandishi wa mawasiliano kwa ombi la msingi linalofaa.

Tamko la akili bandia zalishaji: Waandishi wanaeleza kwamba walitumia Microsoft Copilot na ChatGPT kwa madhumuni ya kupanga muundo wa maandishi, kuboresha uwazi na kupanga sehemu za makala; baadaye walipitia na kuhariri maudhui yaliyotengenezwa na kuchukua jukumu la maandishi ya mwisho.

Dokezo la leseni/hakimiliki: Hakuna leseni wazi ya Creative Commons ya matumizi tena inayoonekana katika preprint iliyopakiwa. Badala ya kunakili picha za hadubini au grafu za chanzo kwa kiwango cha pikseli, inapendekezwa data za namba na mahusiano ya mbinu zichorwe upya kama grafu/michoro asilia ya Verianla.